ШТАММ БАКТЕРИЙ PSEUDOMONAS AERUGINOSA, РАЗЛАГАЮЩИЙ ФОРМАЛЬДЕГИД

ШТАММ БАКТЕРИЙ PSEUDOMONAS AERUGINOSA, РАЗЛАГАЮЩИЙ ФОРМАЛЬДЕГИД


RU (11) 2064018 (13) C1

(51) 6 C12N1/20, C12R1:385, C12N1/20 

(12) ОПИСАНИЕ ИЗОБРЕТЕНИЯ К ПАТЕНТУ РОССИЙСКОЙ ФЕДЕРАЦИИ 
Статус: по данным на 26.12.2007 - прекратил действие 

--------------------------------------------------------------------------------

(21) Заявка: 94010731/13 
(22) Дата подачи заявки: 1994.03.31 
(45) Опубликовано: 1996.07.20 
(56) Список документов, цитированных в отчете о поиске: Авторское свидетельство СССР N 1117316, кл. С 12 N l/20, 1984. 
(71) Заявитель(и): Малое научно-производственное внедренческое предприятие "Сфера" 
(72) Автор(ы): Семин А.Г.; Калгатин В.Г.; Александров А.В.; Мещеряков А.В.; Варнакова Г.В.; Адамов А.К.; Брандзишевский Ю.В.; Минаева Л.Н. 
(73) Патентообладатель(и): Малое научно-производственное внедренческое предприятие "Сфера" 

(54) ШТАММ БАКТЕРИЙ PSEUDOMONAS AERUGINOSA, РАЗЛАГАЮЩИЙ ФОРМАЛЬДЕГИД 

Использование: относится к биотехнологии и может быть использовано для очистки многокомпонентных парагазовых смесей от вредных примесей, в частности для очистки от формальдегида. Сущность изобретения: выделен штамм бактерий Pseudomonas aeruginosa (зарегистрирован в коллекции музея живых культур института "Микроб" г. Саратов), утилизирующий формальдегид. 


ОПИСАНИЕ ИЗОБРЕТЕНИЯ



Изобретение относится к биотехнологии и может быть использовано для очистки многокомпонентных парогазовых смесей от вредных примесей, в частности для очистки от формальдегида.

Известно, что для очистки многокомпонентных парогазовых смесей от NH3, H2S, меркаптана и других органических соединений используют бактерии Pseudomonas sp. (см. а.с. СССР N 1701349, МКИ B 01 D 53/00).

Известно также, что для очистки газовых смесей от органических соединений, в том числе и от формальдегида, применяют биологически активные слои поглотителя, на которых происходит очистка за счет расщепления органических веществ различными культурами бактерий, нанесенных на поглотитель (см. а.с. СССР N 1456202, МКИ B 01 D 53/00).

Однако, в известном источнике не приведены сведения о применяемых микроорганизмах.

Наиболее близким по технической сущности предлагаемому решению является штамм бактерий Pseudomonas aeruginosa 8, разлагающий -метилстирол (см. А.С. N 1117316, кл. C 12 N 1/20, 1984). Однако, не известно применение штамма рода Pseudomonas aeruginosa для очистки от формальдегида.

Решаемая изобретением задача получение штамма Pseudomonas aeruginosa, способного разлагать формальдегид.

Изобретение заключается в том, что выделен штамм бактерий Pseudomonas aeruginosa 103/3 (зарегистрирован в МЖК института "Микроб", КМ 94), утилизирующий формальдегид. Штамм выделен методом прямого посева пробы воды из реки Волга на агар Хоттингера pH 7,6 при 28oС. Для накопления активной биомассы данную среду за 30 минут до посева обрабатывают 0,001% раствором формалина. Через 48 часов инкубации при 28oС биомассу смывают физиологическим раствором.

Полученный штамм имеет следующие морфологические и физиологические признаки: тонкие граммотрицательные палочки; на агаре Хоттингера pH 7,6 через 24 часа инкубации при температуре 28oC вырастают матовые, бугристые, с фестончатым краем колонии, дающие цветочный запах. Вызывает равномерное помутнение бульона и образует белую пленку на поверхности. Штамм подвижный. На чашках с казеиновым агаром он образует зеленый с коричневым оттенком пигмент.

Физиолого-биохимические признаки. Аэроб растет при температуре 5-42oС, оптимум роста 28-37oС. Оптимальный pH сред колеблется в пределах 7/0-7/6. Аэробно не ферментирует глюкозу, не гемолизирует эритроциты, редуцирует нитраты, разжижает желатину, слабо ферментирует крахмал, не образует лецитиназы и левана, гидролизирует твин-80. Не ферментирует лактозу, сахарозу, мальтозу, арабинозу, маннит, глицерин, этанол. Слабо гидролизует сорбит и ксилозу, не образует индола и сероводорода.

Декарбоксилирует лизин, не декарбоксилирует орнитин, дигидрирует аргинин.

Потребляет в качестве единственного источника углерода углеводы: лактозу, сахарозу, слабо мальтозу, арабинозу, ксилозу, усваивает спирты: этанол, глицерин, маннит, дульцит, слабо сорбит, не усваивает инозит, не усваивает эскулин, слабо усваивает инулин.

Использует в качестве единственного источника углерода аминокислоты: a- и b-аланин, аспарагиновую кислоту, гистидин, тирозин, триптофан, слабо метионин, не использует цистин.

Потребляет масляную кислоту, слабо янтарную кислоту, не усваивает никотиновую кислоту.

В качестве единственного источника углерода ассимилирует растворитель 646, слабо стирол и толуол, не потребляет ацетон, ксилол, уайтспирит и фенол.

При культивировании штамма Pseudomonas aeruginosa 103/3 в жидких средах с формальдегидом в качестве единственного источника углерода и энергии микробные клетки этого штамма в течении 24 часов разрушали 0,1 г/л формальдегида, окисляя его до CO2 и H2O.

Пример 1. Культуру Pseudomonas aeruginosa штамм 103/3 выращивают в течение суток в бульоне Хоттингера pH 7,6, затем пересевают во флаконы со скошенной агаровой средой, содержащей 50 мг% аминного азота и 9,7% формальдегида (pH 7,6). Агаровую среду готовят по следующей методике: агар Хоттингера pH 7,6, содержащий 50 мг% аминного азота, расплавляют, охлаждают до 42oС и на один литр среды добавляют 100 мг формальдегида (0,25 мл формалина 40% марки "Ч").

Через трое суток выращивания при 28oС культуру смывают небольшим количеством физиологического раствора NaCL, затем полученную суспензию доводят физиологическим раствором до концентрации 35109 клеток в 1 мл.

В колбы емкостью 500 мл со средой Козера, разлитой по 50 мл, вносят по 4 мл 18-ти млрд-ной суспензии микробов (конечная концентрация 3,3 млрд. в 1 мл).

Состав среды, г/л: NaCl 5,0; MgSO4 0,2; NH4H2PO4 1,0; K2HPO4 1,0; дистиллированная вода до 1,0 л. Среду стерилизуют при 1 атм 30 минут.

Формальдегид вносят непосредственно в колбу с культурой в концентрации 0,025 г/л.

Культуру выращивают при температуре 28oС с ежечасным шуттелированием в течение 5 часов при температуре 18oС.

Контроль за процессом разложения осуществляют с помощью метода газожидкостной хроматографии (ГЖХ) на хроматографе "Цвет-530" с цифроаналоговым заданием режима и детектором ионизации в пламени (ДИП).

Длина колонок насадочного типа 2 м, диаметр 2 мм. Деление исследуемых веществ (ацетона, спирта, формальдегида и оксида углерода) проводили с использованием жидкой фазы карбовакс, нанесенной в количестве 15% на твердый носитель хроматон-N-AW-DMCS. Условие анализа: температура колонок 45oС, температура испарителя и детектора 250oС, скорость газоносителя: азота 30 мл/мин, водорода 30 мл/мин, воздуха 300 мл/мин.

Идентификацию веществ проводили по временам удержания (сравнением стандартными веществами) и методом внутреннего стандарта (введением стандарта в исследуемую биореагенную смесь).

Количественное определение содержания веществ в парогазовой фазе раствором проводили по абсолютной калибровке по площадям пиков на хроматограммах. Ошибка определения 10% относительных. Чувствительность метода 1 мг/м3.

Содержание исследуемых веществ в растворе определяли по калибровочным кривым зависимости содержания веществ в стандартных растворах известной концентрации и парогазовых фазах над ними.

Результаты исследования показывают, что после 24 часов инкубирования штамм Pseudomonas aeruginosa 103/3 разрушает 7,5 мг/л формальдегида. 


ФОРМУЛА ИЗОБРЕТЕНИЯ



Штамм бактерий Pseudomonas aeruginosa КМ 94-103/3 (задепонирован в коллекции музея живых культур института "Микроб" г.Саратова), разлагающий формальдегид.




ПРОЧИТАТЬ НУЖНО ВСЕМ !
Судьба пионерских изобретений и научных разработок, которым нет и не будет аналогов на планете еще лет сорок, разве что у инопланетян



Независимый научно технический портал
Воздухо- и водоочистка. Опреснительные установки






СОВЕРШЕННО БЕСПЛАТНО!
Вам нужна ПОЛНАЯ ВЕРСИЯ данного патента? Сообщите об этом администрации портала. В сообщении обязательно укажите ссылку на данную страницу.


ПОИСК ИНФОРМАЦИИ В БАЗЕ ДАННЫХ


Режим поиска:"и" "или"

Инструкция. Ключевые слова в поле ввода разделяются пробелом или запятой. Регистр не имеет значения.

Режим поиска "и" означает, что будут найдены только те страницы, где встречается каждое из ключевых слов. Например, при запросе "очистка воды" будет найдено словосочетание "очистка воды". При использовании режима "или" результатом поиска будут все страницы, где встречается хотя бы одно ключевое слово ("очистка" или "воды").

В любом режиме знак "+" перед ключевым словом означает, что данное ключевое слово должно присутствовать в найденных файлах. Если вы хотите исключить какое-либо слово из поиска, поставьте перед ним знак "-". Например: "+очистка -воды".

Поиск выдает все данные, где встречается введенное Вами слово. Например, при запросе "сток" будут найдены слова "стоков", "стоки" и другие. Восклицательный знак после ключевого слова означает, что будут найдены только слова точно соответствующие запросу "сток!".


Устройства и способы водоочистки | Опреснительные установки. Дистилляторы | Устройства и способы воздухоочистки


Рейтинг@Mail.ru