ИЗОБРЕТЕНИЕ
Патент Российской Федерации RU2122735
СПОСОБ ДИАГНОСТИКИ ОПИЙНОЙ НАРКОМАНИИ
Имя изобретателя: Морозов С.Г.; Панченко Л.Ф.; Иванец Н.Н.; Котов С.В.; Абрамова О.С.
Имя патентообладателя: Государственный научный центр наркологии МЗ МП РФ
Адрес для переписки:
Дата начала действия патента: 1998.11.27
Способ может быть использован в области медицины, а именно в наркологии для повышения точности и объективизации диагностики опийной наркомании. Больному проводят сочетанное клиническое исследование и твердофазный иммуноферментный анализ сыворотки крови с определением уровня иммунореактивности аутоантител к белку мозга HB-GAM по оптической плотности продуктов реакции и при его снижении более 35% по сравнению со средним уровнем имменореактивности здоровых лиц диагностируют опийную наркоманию.
ОПИСАНИЕ ИЗОБРЕТЕНИЯ
Изобретение относится к медицине, а именно к наркологии.
Известен способ диагностики опийной наркомании путем клинического исследования (Морфинизм. - М., 1984, с.10-31).
Недостатками этого способа являются невысокая точность, субъективность оценки, зависящая от квалификации врача.
Наиболее близким к предлагаемому способу по характеру решаемой задачи и технической сущности является способ диагностики опийной наркомании путем проведения твердофазного иммуноферментного анализа сыворотки крови пациента с определением антител к наркотикам (журн.: "Вопросы наркологии", 1995, N 2, с.36-44).
Недостатками этого способа являются невысокая точность диагностики
(48,1±4,9%),
наличие ложноположительных результатов у
здоровых (4,6±3,1%).
Техническим результатом предлагаемого способа является повышение точности диагностики, отсутствие ложноположительных реакций у здоровых и соматических больных.
Это результат достигается тем, что с помощью твердофазного иммуноферментного анализа определяют уровень иммунореактивности аутоантител к белку мозга НВ-GAM в сыворотке крови по оптической плотности продуктов реакции и при его снижении более 35% по сравнению со средним уровнем иммунореактивности здоровых лиц диагностируют опийную наркоманию.
Не вытекает из известного уровня техники тот факт, что снижение уровня иммунореактивности аутоантител к белку мозга HB-GAM более 35% по сравнению со средним уровнем здоровых лиц может служить диагностическим критерием опийной наркомании.
Способ осуществляют следующим образом
Полистироловые планшеты фирмы "Nunc" (Дания) активируют раствором НВ-GAM с концентрацией 2 мкг/мл в 0,05 М карбонатном буфере c рН 9,6 - вносят по 100 мкл в лунку. Инкубацию проводят при
4oС в течение 16 ч. После отмывания планшет от несвязавшейся части антигена отмывающим буфером (140 мМ NaCl; 2,7 мМ КСl; 1,5 мМ КН2РО4; 8,7 мМ NaHPO4), содержащим 0,05% Твина 20, их помещают в 0,05%-ный раствор желатины на 1 ч при
36oС. После этого наносят сыворотки больных и 10 здоровых лиц, разведенные в 200 раз, по 100 мкл. Для построения калибровочной кривой на планшет наносят по 3 образца сыворотки здоровых лиц, разведенные в 200, 300, 400, 600 и 800 раз. Все разведения осуществляют на отмывающем буфере без Твина 20. Инкубацию проводят в течение 16 ч при 4oС. Затем планшет отмывают аналогичным образом и наносят вторичные антитела - антивидовые IgG, конъюгированные с пероксидазой хрена ("Sigma", США) в разведении 1:2000. Инкубируют в течение 3 ч при комнатной температуре. После отмывания планшета реакцию проявляют 0,01%-ным раствором о-фенилендиамина с 0,001%-ной перекисью водорода на 0,2 М цитрат-фосфатном буфере рН 5,0. Спустя 10-15 мин фотометрически определяют оптическую плотность продуктов реакции на длине волны 492 нм. Реакции сывороток больных оценивают относительно среднего уровня иммунореактивности сывороток здоровых лиц.
При снижении уровня иммунореактивности аутоантител к белку мозга НВ-GAM, оцениваемой по оптической плотности продуктов реакции, более 35% по сравнению со средним уровнем иммунореактивности здоровых лиц диагностируют опийную наркоманию.
Пример. Больная С., 1977 г.р. История болезни 703. Поступила в Государственный научный центр наркологии 29.04.96. Эпизодическое употребление опиатов в течение 2 мес, физическая зависимость в течение 2 лет. Явления абстиненции проявляются в виде снижения настроения, бессонницы, головной боли, боли в мышцах, а также болей тянущего, выкручивающего характера. Больной проведено определение уровня сывороточной иммунореактивности аутоантител к белку мозга НВ-GAM с помощью твердофазного иммуноферментного анализа. Оптическая плотность продуктов реакции 0,429. Среднее значение аналогичного показателя у здоровых лиц 0,670. Снижение иммунореактивности у обследованной больной, выраженное в единицах оптической плотности, составило 36%. Диагноз опийной наркомании подтвержден.
Указанным способом проведено исследование 27 больных опийной наркоманией с физической зависимостью от наркотика от полгода до семи лет, 97 здоровых лиц и 54 соматических больных. Совпадение результатов клинического исследования и предлагаемого способа отмечено в 85% случаев. Ложноположительных результатов у здоровых и соматических больных не отмечено.
Предлагаемый способ имеет преимущества перед известными, заключающиеся в повышении точности и объективизации диагностики. Способ может быть применен для комплексной диагностики опийной наркомании.
ФОРМУЛА ИЗОБРЕТЕНИЯ
Способ диагностики опийной наркомании путем проведения клинического исследования и твердофазного иммуноферментного анализа сыворотки крови больного, отличающийся тем, что определяют уровень иммунореактивности аутоантител к белку мозга HB-GAM по оптической плотности продуктов реакции и при его снижении более 35% по сравнению со средним уровнем иммунореактивности здоровых лиц диагностируют опийную наркоманию.
Версия для печати
Дата публикации 21.05.2007гг
вверх
|
