БИОПРЕПАРАТ-ПРОБИОТИК БИФИДИН ДЛЯ ЛЕЧЕНИЯ ИНФЕКЦИОННЫХ ЗАБОЛЕВАНИЙ И ДИСБИОЗОВ РАЗЛИЧНОЙ ЭТИОЛОГИИ И СПОСОБ ЛЕЧЕНИЯ ИНФЕКЦИОННЫХ БОЛЕЗНЕЙ И ДИСБИОЗОВ РАЗЛИЧНОЙ ЭТИОЛОГИИ
(51) 7 C12N1/20, A61K35/74, A61P1/00
(12) ОПИСАНИЕ ИЗОБРЕТЕНИЯ К ПАТЕНТУ РОССИЙСКОЙ ФЕДЕРАЦИИ
Статус: по данным на 17.09.2007 - действует
--------------------------------------------------------------------------------
Документ: В формате PDF
(14) Дата публикации: 2005.11.20
(21) Регистрационный номер заявки: 2004110702/13
(22) Дата подачи заявки: 2004.04.09
(24) Дата начала отсчета срока действия патента: 2004.04.09
(45) Опубликовано: 2005.11.20
(56) Аналоги изобретения: RU 2164801 C1, 10.04.2001. RU 2164143 C1, 20.03.2001. RU 2099956 C1, 27.12.1997. RU 2072856 C1, 10.02.1997. RU 2083666 C1, 10.07.1997. ПОСПЕЛОВА В.В. и др. Бифидобактерии вида В. adolescentis и перспективы их использования в составе пробиотиков медицинского назначения (состояние проблемы). Пробиотические микроорганизмы - современное состояние
вопроса и перспективы использования. Сборник материалов конференции "Международная научно-практическая конференция памяти Галины Ивановны Гончаровой". - М., 2002, с.12-13.
(72) Имя изобретателя: Поспелова В.В. (RU); Ворошилина Н.Н. (RU); Грачева Н.М. (RU); Гаврилов А.Ф. (RU); Семенихина В.Ф. (RU); Сундукова М.Б. (RU); Осипова И.Г. (RU)
(73) Имя патентообладателя: Государственное Учреждение "Московский научно-исследовательский институт эпидемиологии и микробиологии им. Г.Н. Габрического МЗ РФ" (RU)
(98) Адрес для переписки: 125195, Москва, ул. Фестивальная, 27, кв.51, В.В. Поспеловой
(54) БИОПРЕПАРАТ-ПРОБИОТИК БИФИДИН ДЛЯ ЛЕЧЕНИЯ ИНФЕКЦИОННЫХ ЗАБОЛЕВАНИЙ И ДИСБИОЗОВ РАЗЛИЧНОЙ ЭТИОЛОГИИ И СПОСОБ ЛЕЧЕНИЯ ИНФЕКЦИОННЫХ БОЛЕЗНЕЙ И ДИСБИОЗОВ РАЗЛИЧНОЙ ЭТИОЛОГИИ
Биопрепарат - пробиотик Бифидин содержит живую культуру штамма бифидобактерий Bifidobacterium.adolescentis МС-42 в титре 10 5-1011 КОЕ/мл и продукты жизнедеятельности бифидобактерий, обладающие выраженным бифидогенным эффектом. В частности, продукты жизнедеятельности включают арабинофураногидролазу, -галактозу, протеиназу, белково-полисахаридный комплекс, щелочную протеазу и декстраназу. Они характеризуются ниспадающей кривой с перегибом в области 235-245 нм и максимум 266±2 в ультрафиолетовом спектре поглощения в диапазоне длин волн 205-400 нм при разведениях 1:100. Продукты жизнедеятельности продуцируются в культуральную среду при культивировании в течение 16-18 ч на питательной среде, в которую добавлен стабилизатор в количестве 30-50 об.% от объема среды. В качестве стабилизатора используют желатин, сахарозу, аскорбиновую кислоту при следующих соотношениях компонентов, мас.%: желатин - 9,0 - 12,0; аскорбиновая кислота - 0,5-1,0; сахароза - 0,5-0,7%; вода - остальное, до 100. Способ лечения инфекционных болезней и дисбиозов различной этиологии предусматривает введение пациенту в эффективном количестве вышеобозначенного биопрепарата - пробиотика. 2 н. и 3 з.п. ф-лы, 5 ил., 5 табл.
ОПИСАНИЕ ИЗОБРЕТЕНИЯ
Изобретение относится к биотехнологии и медицине, и касается разработки пробиотика для лечения инфекционных заболеваний, дисбиозов различной этиологии и способа лечения этих заболеваний с помощью нового пробиотика.
Известны бактериальные препараты - пробиотики, содержащие живые бифидобактерии, подавляющие рост патогенных и условно-патогенных бактерий. Эти биопрепараты нашли широкое применение для лечения и профилактики дисбактериоза и дисфункций кишечника, и других инфекционных болезней, например для лечения неспецифических бактериальных вагинозов, коррекции микрофлоры родовых путей, профилактики мастита.
Известен бактериальный препарат бифидумбактерин сухой, содержащий высушенную культуру B.bifidum 1 в защитной среде (Регламент производства бифидумбактерина №557-96).
Препарат бифидумбактерин сухой, полученный по этой технологии, широко используется в медицинской практике. Однако недостатком данного препарата является невысокое содержание живых бифидобактерий в дозе. Кроме того, в состав препарата входит освобожденная от метаболитов биомасса, вследствие чего бифидобактерии быстро теряют жизнеспособность, что снижает стабильность и эффективность препарата.
Известен способ лечения и профилактики инфекционных болезней, в том числе неспецифических бактериальных вагинозов, мастита, коррекции микрофлоры родовых путей, дисбактериоза и дисфункций кишечника с применением бифидумбактерина сухого (Гончарова Г.И., Семенова Л.П., Козлова Э.П. и др. Применение сухого бифидумбактерина в комплексном лечении недоношенных и доношенных детей и детей раннего возраста: Методические рекомендации. М. - 1988 г.).
Однако вследствие недостаточной эффективности бифидумбактерина при лечении острых кишечных инфекций (ОКИ) и дисбактериозов его следует принимать длительное время (3-4 недели), а для получения стойкого восстановления нормофлоры необходимо применять препарат несколькими курсами до 3-4 месяцев.
Известен биопрепарат Бифидумбактерин, содержащий лиофилизированную суспензию бактерий штамма В. bifidum 1. в питательной среде с добавлением защитной сахарозо-желатиномолочной среды высушивания с аскорбиновой кислотой или цистеином (SU №1364341, опубл. 07.01.1988).
Недостатком препарата является необходимость длительного применения для достижения стойкого бактериологического эффекта и медленная коррекция местного иммунитета, особенно у ослабленных больных.
Недостатком данного препарата также является невысокая эффективность и длительные сроки лечения.
Известен также препарат бифидумбактерин, содержащий лиофилизированную культуру штамма В.bifidum 791 в среде высушивания на основе обрата молока, желатина и сахарозы. Препарат предназначен для комплексного лечения желудочно-кишечных заболеваний, пневмонии, сепсиса и других гнойно-инфекционных заболеваний (Патент RU №2072856, А 61 К 35/74, опубл. 10.02.1997).
Недостатком препарата является потери при центрифугировании целевого продукта, т.к. с отделяемой культуральной жидкостью уходят метаболиты бифидобактерий, отсутствие которых отрицательно сказывается на выживаемости бактерий при сушке и хранении.
Известен также пробиотик бифидумбактерин форте, содержащий лиофилизированную биомассу бифидобактерий, бифидогенный компонент - лактозу или фруктоолигосахарид, иммобилизатор - активированный уголь, пищевые волокна или каолин, а также защитную среду высушивания из желатина и сахарозы. Дозированная лекарственная форма выполнена в виде таблеток или капсул, покрытых гастростойким покрытием из шеллока или ацетилфталилцеллюлозы. Известен способ лечения острых и хронических кишечных заболеваний, включающий введение пробиотика бифидумбактерин форме по схеме: в первые сутки - 4-40 г, через 12 ч 4-12 г, на вторые сутки - 4-18 г, на 3-и сутки 4-12 г, на 4-е и последующие сутки - 3-9 г (Патент RU №2164143, А 61 К 35/74, опубл. 20.03.2001).
Недостатком данного препарата являются противопоказания при лактопатии.
Наиболее близким аналогом является биопрепарат - пробиотик «Экофлор» в сухой иммобилизированной форме, содержащий сорбент, клетки эубиотиков - бифидобактерии в титре 108-1010 КОЕ/г, иммобилизированные на сорбенте, и защитную среду на основе желатина, аскорбиновой кислоты, хлористого натрия и сахарозы, причем клетки эубиотиков используют совместно с питательной средой на молочной основе, а из бифидобактерий используют штаммы B.bifidum 1 или B.bifidum 791 или ЛВА-3 или B.longum 379 или В. adolescentis MC-42 или их смесь (Патент RU №2164801, А 61 К 35/74, опубл 10.04.2001).
Однако в состав биопрепарата входит среда на молочной основе, которая нестандартна, и, как правило, содержит следы антибиотиков и гормонов, что может вызывать побочное действие. Кроме того, биопрепарат имеет противопоказания для приема: он не рекомендуется при лактозопатии, а также для приема ослабленным детям, т.к. сорбенты адсорбируют на свою поверхность витамины группы В и С.
Технический результат изобретения заключается в создании препарата, не имеющего противопоказаний, позволяющего снизить сроки лечения больного и повысить эффективность лечения дисбиоза различной этиологии за счет улучшения адгезивных свойств и колонизации, повышения активности в отношении патогенных и условно патогенных микроорганизмов возбудителей желудочно-кишечных заболеваний, стимуляции неспецифической резистентности, снижения потребления антибиотиков при лечении и профилактике ряда кишечных инфекций.
Сущность изобретения заключается в следующем.
Биопрепарат - пробиотик Бифидин содержит живую культуру штамма бифидобактерий Bifldobacterium adolescentis МС-42 в титре 105-1011 КОЕ/мл и продукты их жизнедеятельности, полученные при культивировании в течение 16-18 ч на питательной среде, в которую добавлен стабилизатор в количестве 30-50% от объема среды, и характеризуемые ниспадающей кривой с перегибом в области 235-245 нм и максимум 266±2 в ультрафиолетовом спектре поглощения в диапазоне длин волн 205-400 нм при разведениях 1:100.
В качестве стабилизатора используют желатин, сахарозу, аскорбиновую кислоту при следующих соотношениях компонентов, мас.%: желатин - 9,0-12,0; аскорбиновая кислота - 0,5-1,0; сахароза - 0,5-0,7%; вода - остальное, до 100%.
Биопрепарат Бифидин может быть в жидкой форме или лиофильно высушен.
Особенностью биопрепарата - пробиотика Бифидин является то, что помимо биомассы бифидобактерий он содержит продукты жизнедеятельности бифидобактерий, обладающие выраженным бифидогенным эффектом.
Установлено, что в процессе роста культуры В. adolescentis МС-42 на питательной среде, в которую добавлен стабилизатор в количестве 30-50% от объема среды, при инкубации в течение 16-18 ч при температуре (38±1)°С происходит значительное накопление в клетках и культуральной жидкости полифосфатных включений (волютина), белково-полисахаридного комплекса (БПК), щелочной протеазы и декстраназы, Кроме того, штамм продуцирует специфические энзимы: арабинофураногидролазу, -галактозу, протеиназу, ответственные за важные физиолого-биологические процессы в пищеварительном тракте.
Данные условия культивирования штамма приводят к высокой интенсивности процессов метаболизма и, следовательно, значительному защитному эффекту, в частности подавлению роста патогенных и условно патогенных микроорганизмов.
Фракционный состав ультрафильтрата биопрепарата Бифидин изучен методом гель-хроматографии на сефадексе G-75 и сефадексе G-25 (фиг. 1 и 3). Для сравнения исследован фракционный состав ультрафильтрата биопрепарата Бифидумбактерина (фиг. 2 и 4). Результаты свидетельствуют, что ультрафильтрат Бифидина содержит мономерную фракцию с молекулярной массой не менее 1450 КДа, которая не выявляется в ультрафильтрате Бифидумбактерина.
Ультрафиолетовый спектр поглощения биопрепарата Бифидин изучен на спектрофоторетре СФ-46 в диапазоне длин волн 205-400 нм при различных разведениях ультрафильтрата биопрепарата.
УФ-спектр ультрафильтрата биопрепарата Бифидин при разведениях 1:100 представляет собой ниспадающую кривую с перегибом в области 235-245 нм и максимум 266±2 (фиг. 5).
Бифидин имеет высокую клиническую эффективность при лечении различных острых кишечных инфекционных заболеваний, энтеритов, колитов, в том числе и у младенцев.
Препарат назначают больным по 5 доз 2 раза в день за 30 минут до еды, в течение 5-8 дней.
Клинические испытания, проведенные на больных с острыми кишечными заболеваниями (острой дизентерией, сальмонеллезом, ротавирусным гастроэнтеритом, эшерихиозом E.coli 0151, аденовирусным заболеванием с кишечным синдромом и пищевыми токсикоинфекциями /ПТИ/), продемонстрировали следующее:
1. Высокую клиническую эффективность (исчезновение интоксикации, прекращение болей в животе, нормализация стула к 3 суткам).
2. Элиминацию возбудителя (особенно резистентного к антибиотикам).
3. Санирующую активность в отношении патогенных бактерий (в частности, сальмонелл).
4. После проведенного короткого курса лечения наблюдается положительная динамика в микрофлоре кишечника.
Изобретение иллюстрируется следующими примерами:
Пример 1.
Штамм В. adolescentis MC-42 первого пассажа выращивают на агаризованной среде в анаэробных условиях в течение 42-48 ч при температуре 38±1°С для получения изолированных колоний.
По окончанию инкубации отбирают гладкие колонии, которые (не менее 25-30 колоний) засевают в жидкую адекватную питательную среду /2 пассаж/.
2-й пассаж пересевают в оптимальную питательную среду /3-й пассаж/. 4-й пассаж засевают в любую жидкую питательную среду, подходящую для культивирования бифидобактерий, например среду Блаурокка или казеино-дрожжевую среду (среда КД-5), в которую добавляют стабилизатор в количестве 30-50% от объема. В качестве стабилизатора используют желатин, сахарозу, аскорбиновую кислоту при соотношениях компонентов, мас.%: желатин - 10,0; аскорбиновая кислота - 1,0; сахароза - 0,7; вода - остальное до 100%.
Культуру В. adolescentis MC-42 инкубируют в течение 16-18 ч при температуре (38±1)°С. За это время происходит значительное накопление в клетках и культуральной жидкости полифосфатных включений (волютина), ВПК, щелочной протеазы и декстраназы, арабинофураногидролазы, -галактозы, протеиназы.
Для получения жидкой формы препарат фасуют по 5 мл во флаконы под резиновыми пробками и завальцовывают.
Для получения лиофильно высушенной формы препарат фасуют по 5 мл во флаконы, подвергают лиофильному высушиванию, закрывают резиновыми пробками и завальцовывают.
Пример 2. Полученный по примеру 1 пробиотик Бифидин исследуют на бактерицидную активность. В качестве контроля используют пробиотик Бифидумбактерин (изготовленный по Регламенту производства бифидумбактерина №557-96).
Чувствительность тест-штаммов (S.aureus 209, S.aureus 3Ч, E.fecalis 115Ч, E.coli 22Ч, Enterobacter ss р №3Ч) к биопрепаратам различных вариантов изучают диффузионным методом.
На поверхность питательной среды в чашках Петри наносят 1-2 мл бактериальной суспензии (10 9 КОЕ/мл). Избыток жидкости удаляют пипеткой. После подсушивания чашек на поверхность агара помещают диски из фильтровальной бумаги, пропитанные изучаемыми биопрепаратами.
Бифидин и контроль исследуют в разведениях - исх.; 1:2; 1:5. Посевы инкубируют при 37°С в течение 24 ч.
Чувствительность культур к биопрепаратам выражают в мм диаметра зон задержки роста. Резистентными считают штаммы, зоны задержки роста которых составляют 0-8 мм; чувствительными - 9-18 мм; высокочувствительными - более 18 мм. Результаты представлены в табл. 1.
При изучении выявлено, что Бифидин обладает высокой бактерицидной активностью к штаммам стафилококка и энтерококка в разведениях 1:5, к штаммам кишечной палочки и энтеробактера - 1:2, тогда как Бифидумбактерин был активен только в исходных разведениях (табл.1).
Пример 3. Действие препаратов на условно-патогенные бактерии определяют методом серийных разведений в жидкой среде Гаузе №2.
В первую пробирку с 3 мл жидкой среды Гаузе №2 пипеткой добавляют 3 мл Бифидина или известный пробиотик Бифидумбактерин.
После перемешивания взвеси пипеткой не менее 10 раз проводят серию 2-кратных разведений. Пипетки меняют после каждого разведения. К полученным разведениям биопрепаратов добавляют по 0,2 мл бактериальной взвеси тест-штаммов (S.aureus 209, E.fecalis 115Ч или Candida albicans 5Ч). Концентрация бактерий соответствует 5 ед. отраслевого стандарта образца мутности ГИСК им.Л.А.Тарасевича (ОСО 42-28-59-85).
Для контроля роста культуры производят засев 0,2 мл тест-штамма, соответствующий 5 ед. отраслевого стандартного образца, в (3 ±0,1) мл для титрования. Учет результатов проводят через (20±2) ч после инкубации культуры при температуре (36±1)°С.
Титр биопрепарата устанавливают по пробирке с наивысшим разведением препарата, в котором визуально отмечалось отсутствие роста тест-штамма.
Выявлено, что Бифидин лучше подавляет рост стафилококков и энтерококков в разведении 1:64, грибов Кандида - 1:8, тогда как в контроле (пробиотик Бифидумбактерин) - 1:8 и 1:4 соответственно (табл.2).
Таким образом, показано, что препарат Бифидин проявляет более высокую бактерицидную активность по сравнению препаратом Бифидумбактерином.
Пример 4. Изучение антагонистической активности Бифидина и коммерческого препарата Бифидумбактерина проводят в отношении условно патогенных микроорганизмов, выделенных от больных с дисбиозами различной этиологии.
На подсушенные чашки Петри со средой МРС-5 по диаметру петлей 3,5±0,5 мм высевают штрихом изучаемую культуру препарата. Посевы инкубируют в термостате при 37±1°С в течение 72 ч в анаэростате. Затем, отступив на 1 мм от выросшей культуры, перпендикулярным штрихом подсевали тест-штаммы.
Учет результатов проводят через 18 ч инкубирования при 37±1°С по величине зон угнетения роста тест-штаммов (измеряя эти зоны линейкой: от испытуемой культуры до начала роста тест-культур в мм). Контролем роста тест-культур служит их параллельный посев штрихом на чашки с той же средой.
Результаты исследования антагонистического действия препаратов на факультативных аэробов представлены в таблице 3.
Как видно из полученных данных Бифидин характеризуется более выраженной антагонистической активностью в отношении клинических штаммов шигелл, сальмонелл, стафилококков, стрептококков по сравнению с контролем (препаратом Бифидумбактерином). Клинические штаммы грибов рода Candida были устойчивы к воздействию молочнокислых бактерий (табл. 3).
Таким образом, полученные данные об антагонистической активности свидетельствуют о преимуществе препарата Бифидин по сравнению с Бифидумбактерином.
Пример 5. Испытания препарата Бифидин проводились в клиническом отделе МНИИЭМ им. Г.Н.Габричевского на базе 1-й городской клинической инфекционной больницы на взрослых 52 пациентах, с острой дизентерией, сальмонеллезом и эшерихиозом.
Одновременно в тех же условиях были проведены наблюдения в группе сравнения из 42 пациентов, получавших коммерческий Бифидумбактерин. Этиологическая структура и характер течения заболеваний в группе сравнения были аналогичны таковым в основной группе. В обеих группах преобладали больные со среднетяжелым течением кишечной инфекции.
Биопрепараты Бифидин (в основной группе) и Бифидумбактерин (в группе сравнения) назначали больным ОКИ по 5 доз 2 раза в день, курс лечения составил 7-8 дней. Никаких побочных явлений не было отмечено ни в одном случае.
Эффективность лечения определяли по срокам исчезновения интоксикации, прекращения болей в животе и нормализации стула в днях от момента поступления в стационар, а также по результатам исследований микрофлоры кишечника на дисбактериоз.
Как видно из представленных в табл.4 данных, по всем клиническим показателям Бифидин не уступал коммерческому Бифидумбактерину, а по срокам нормализации стула способствовал более выраженной положительной динамике по сравнению с Бифидумбактерином.
У больных ОКИ Бифидин в большей степени, чем Бифидумбактерин, оказывает положительное влияние на микрофлору кишечника. Так, частота дисбактериоза III-IV степени, выявленная в основной группе до лечения у 80,0±11,2% больных, снизжается после применения Бифидина до 55,0±9,7%, т.е. более чем 20%. В группе сравнения при исходной частоте дисбактериоза той же степени 61,5±9,2% ее снижения после применения Бифидумбактерина происходит до 53,8±6,9%, т.е. практически на 8%.
С достоверностью отмечено, что в группе больных, получавших Бифидин, было более выраженным нарастание количества бифидобактерий: от 4,3±0,4 lg до,1±0,7 lg по сравнению с группой получавших Бифидумбактерин, где показатели составляли, соответственно, от 6,4±0,6 lg до 6,8±0,7 lg. Кроме того, у получавших Бифидин достоверно уменьшилось количество условно-патогенных микробов: от 3,2±0,3 lg до 1,4±0,014 lg, тогда как у получавших Бифидумбактерин эти показатели сохранялись практически на исходном уровне: 5,0±0,5 и 5,4±0,5 lg до и после лечения (табл.5).
Таким образом, по выраженной клинической эффективности Бифидин не уступал коммерческому Бифидумбактерину, а по действию на восстановление бифидофлоры и элиминацию условно-патогенных микроорганизмов даже превосходил его.
Пример 6. Бифидин применяли у детей, страдающих ОКИ (105 человек), в основном преобладали больные сальмонеллезом. В случае с неустановленной этиологией заболевание характеризовалось гастроэнтероколитом или энтероколитом.
Ко времени назначения Бифидина кишечные расстройства сохранялись у 41 ребенка в виде жидкого учащенного стула с патологическими примесями (слизь, зеленое окрашивание). У 12 детей после перенесенного сальмонеллеза продолжалось выделение сальмонелл при оформленном стуле. Среди больных с кишечными расстройствами преобладали дети с затяжным течением заболевания, получавшие безуспешно (до назначения Бифидина) антибактериальные и/или другие бактерийные препараты (преимущественно бифидумбактерин).
Препарат назначали по 5 доз 2 раза в день, в течение 7-10 дней. Изредка (не более чем в 10-15% случаев) при затяжном процессе прием Бифидина продолжали до 2 недель.
Одновременно в тех же условиях были проведены наблюдения в группе сравнения из 45 детей, получавших коммерческий бифидумбактерин. Этиологическая структура и характер течения заболеваний в группе сравнения были аналогичны таковым в основной группе. Группа сравнения по возрастному составу больных была сопоставима с опытной. Бифидумбактерин назначали по 5 доз 2 раза в сутки в течение 2 недель.
Бифидин все дети переносили хорошо, аллергических реакций не возникало, увеличения числа эозинофилов в периферической крови не было, побочных реакций на прием Бифидумбактерина выявлено не было, только у 2 больных из 22 обследованных отмечено небольшое повышение числа эозинофилов в периферической крови (от 5 до 10%).
К окончанию курса лечения Бифидином стул нормализовался у 56,1% больных, у остальных отмечено улучшение характера испражнений, их урежение, уменьшение или исчезновение патологических примесей. В результате применения Бифидумбактерина нормализация стула достигнута у 50% больных; улучшение характера испражнений и уменьшение частоты дефекаций отмечено у 38,1%; эффект отсутствовал у 11,9% больных. По окончании курса лечения Бифидумбактерином 24,4% ввиду недостаточности эффекта терапия была продолжена другими биопрепаратами.
Исследованиями микрофлоры кишечника выявлено нормализующее влияние обоих препаратов на содержание кишечной палочки, но в контрольной группе число гемолитических форм сохранялось на прежнем уровне. В группе детей, применявших Бифидин, зарегистрировано увеличение содержания бифидобактерий.
Выявлена санирующая активность Бифидина в отношении сальмонелл. Назначение Бифидина 12 детям из наблюдаемой группы, выделявшим сальмонеллы при оформленном стуле после перенесенной инфекции, привело к элиминации возбудителя у 58,3%.
Таким образом, при ОКИ у детей по клиническим и лабораторным показателям Бифидин не уступал коммерческому Бифидумбактерину и оказался несколько более активным по стимулирующему влиянию на бифидофлору (увеличение частоты высева бифидобактерий на 25% по сравнению с выявлением у Бифидумбактерина - 18%). Важно также отметить, что обсуждаемые положительные результаты были достигнуты от применения Бифидина после более короткого курса лечения (7-10 дней), чем после применения Бифидумбактерина (14 дней).
Пример 7. Бифидин применяли как средство восстановительной бактериальной терапии, в комплексе с общеукрепляющими, седативными и десенсибилизирующими препаратами у 20 больных неспецифическими язвенным колитом рецидивирующего или непрерывного течения. Препарат применяли по 5 доз 2 раза в сутки в течение 10 дней. Группу сравнения составили 20 больных неспецифическим язвенным колитом, которые получали коммерческий препарат Бифидумбактерин, также на фоне базисной комплексной терапии. По возрастному составу, полу, форме и тяжести заболевания группа сравнения соответствовала основной наблюдаемой группе, получавшей Бифидин. Курс лечения бифидумбактерином также составлял 10 дней при той же суточной дозировке.
Данные о клинической эффективности Бифидина позволяют говорить, что 10-дневный курс приема препарата приводит: к исчезновению спазма толстой кишки, вздутия кишечника, метеоризма; нормализации температуры - до 36,7°С по сравнению с 37,2°С в начале лечения (у пациентов с продолжительным субфебрилитетом); увеличению веса тела в среднем на 1,3 кг (похудания не отмечено), уменьшения кратности стула. Установлено, что на фоне приема Бифидина нормализация состава микрофлоры выявлена у 83,3% больных, получавших Бифидин, и у 67,2% больных, принимавших Бифидумбактерин. При этом титр лакто- и бифидобактерий, энтерококков, лактококков у больных, принимавших Бифидин, составил 6,8 lg/мл, а после бифидумбактерина - 5,1 lg/мл.
Соотношение между микрофлорой с бродильным метаболизмом и дыхательным составило 15/0,2 у больных, принимавших Бифидин, и 14,9/1,2 после приема Бифидумбактерина. Соотношение в % между кокковой флорой и палочковой было 19/81 после приема Бифидина и 29/71 у больных, получавших Бифидумбактерин. Титр золотистого стафилококка после приема Бифидина снизился до 0,8 lg/мл по сравнению с 2,3 lg/мл до начала лечения, а после приема Бифидумбактерина составлял 1,4 lg/мл по сравнению 2,2 lg до лечения. Титр протея составил 0,2 lg/мл после приема Бифидина по сравнению с 3,3 lg/мл до лечения, а после применения Бифидумбактерина составлял 0,8 lg/мл по сравнению с 3,4 lg/мл до лечения.
Таким образом, в результате проведенных исследований выявлена более высокая клиническая и бактериологическая эффективность Бифидина при лечении неспецифического язвенного колита по сравнению с коммерческим Бифидумбактерином.
Таблица 4
Сроки нормализации основных клинических показателей у взрослых больных ОКИ, при лечении Бифдином и коммерческим Бифидумбактерином
Клинические показатели Название препарата Количество больных Сроки нормализации основных клинических показателей в днях (М±m)
Исчезновение интоксикации Бифидин 39 3,2±0,15
Бифидумбактерин 41 2,9±0,10
Прекращение болей в животе Бифидин 37 3,7±0,31
Бифидумбактерин 32 3,9±0,43
Нормализация стула Бифидин 39 3,2±0,22
Бифидумбактерин 42 3,9±0,39
Таблица 5
Состав микрофлоры толстого кишечника у больных ОКИ до и после лечения Бифидином и Бифидумбактерином
Биопрепарат Сроки обследования Количество микрофлоры в фекалиях Ig КОЕ/мл
Эшерихии Бифидобактерии Лактобактерии Условно-патогенная микрофлора
Бифидин До лечения 8,2±0,8 4,3±0,4 2,2±0,2 3,2±0,3
После лечения 8,5±0,8 7,1±0,7 3,1±0,3 1,4±0,14
Р 0,05 0,05 0,05 0,05
Бифидумбактерин До лечения 8,7±0,9 6,4±0,6 2,9±0,3 5,0±0,5
После лечения 8,4±0,8 6,8±0,7 2,7±0,7 5,4±0,5
Р 0,05 0,05 0,05 0,05
ФОРМУЛА ИЗОБРЕТЕНИЯ
1. Биопрепарат-пробиотик для лечения инфекционных заболеваний и дисбиозов различной этиологии, содержащий живую культуру штамма бифидобактерий Bifidobacterium adolescentis MC-42 в питательной среде и стабилизатор, отличающийся тем, что содержит бифидобактерии в титре 105-1011 КОЕ/мл и продукты их жизнедеятельности, полученные при культивировании в течение 16-18 ч на питательной среде, в которую добавлен стабилизатор в количестве 30-50% от объема среды, и характеризуемые ниспадающей кривой с перегибом в области 235-245 нм и максимум 266±2 в ультрафиолетовом спектре поглощения в диапазоне длин волн 205-400 нм при разведениях 1:100.
2. Биопрепарат по п.1, отличающийся тем, что из продуктов жизнедеятельности он содержит арабинофураногидролазу, -галактозу, протеиназу, белково-полисахаридный комплекс, щелочную протеазу и декстраназу.
3. Биопрепарат по п.1, отличающийся тем, что в качестве стабилизатора используют желатин, сахарозу, аскорбиновую кислоту при следующих соотношениях компонентов, мас.%: желатин-9,0-12,0; аскорбиновая кислота-0,5-1,0; сахароза-0,5-0,7%; вода - остальное до 100%.
4. Биопрепарат по любому из пп.1-3, отличающийся тем, что лиофильно высушен.
5. Способ лечения инфекционных болезней и дисбиозов различной этиологии путем введения пациенту биопрепарата-пробиотика на основе живой культуры штамма бифидобактерий Bifidobacterium.adolescentis МС-42, отличающийся тем, что пациенту вводят в эффективном количестве биопрепарат по п.1.
Независимый научно технический портал
На главную страницу раздела
