ИЗОБРЕТЕНИЕ
Патент Российской Федерации RU2097427
СПОСОБ ИНАКТИВАЦИИ ВИРУСА СПИДа
Имя изобретателя: Федченко Петр Петрович; Туев Владимир Владимирович
Имя патентообладателя: Федченко Петр Петрович; Туев Владимир Владимирович
Адрес для переписки:
Дата начала действия патента: 1996.02.22
Использование: способ инактивации вируса СПИДа относится к вирусологии, в
частности к средствам лучевой нейтрализации вируса СПИД. Сущность изобретения:
вирусный материал облучают комбинированным светом, соответствующим электронным
переходам атомов магния 516,7; 517,2; 518,2 нм и атомов цинка 636,2 нм в течение 30 - 60 мин, в
результате чего у вируса СПИДа происходят существенные изменения как в нуклеиновых
кислотах, так и в ферменте обратной транскриптазы, что приводит к инактивации вируса.
ОПИСАНИЕ ИЗОБРЕТЕНИЯ
Изобретение относится к вирусологии, в частности к средствам лучевой
нейтрализации вируса СПИДа.
Известен способ инактивации вируса СПИДа путем облучения его светом на длине
волны 636,2 нм в течение 30 60 мин [1]
Недостатком указанного способа является низкая инактивация вируса СПИДа.
Задачей изобретения является большая инактивация ферментной системы вируса.
Известно, что в качестве генетического материала вируса СПИД является молекула РНК,
содержащая, как известно, пять атомов магния. Молекула РНК будет выполнять свои функции
только в случае надежной ее защиты от возмущающего действия света на электронных
переходах атома магния.
Известно также, что процесс обратной транскрипции в вирусе СПИДа, как и в других
ретровирусах, осуществляется с помощью фермента обратной транскриптазы (ревертазы),
которая функционирует с участием атомов цинка. Успешное протекание этого процесса
будет только в том случае, когда электронная оболочка атома цинка также (как и атом
магния) будет надежно защищена от света, соответствующего длине волны 636,2 нм. В этой
связи можно полагать, что при воздействии света на вирус СПИДа на электронных
переходах атомов магния (516,7; 517,2; 518,2 нм) и электронных переходах атомов цинка (636,2 нм)
могут затрагиваться как нуклеиновые кислоты, так и фермент обратной транскриптазы, что
значительно понизит активность вируса.
В этой связи был выполнен специальный эксперимент, заключающийся в следующем.
На модели клеточных лимфобластоидных клеточных линий СЕМ и МТ-4, инфицированных
вирусом иммунодефицита человека (ВИЧ) штамм ВИЧ-1/B RU (острая инфекция), исследована
возможность лучевой нейтрализации вируса.
Материалы и методы. Клетки. Клетки МТ-4 выращивали в виде суспензии в среде PPMI 1640 с 15%
фетальной сыворотки телят, 100 мкг/мл гентамицина в концентрации 300000 500000 клеток в 1 мл.
Вирус. Штамм ВИЧ-1/B RU получен из музея штаммов института вирусологии РАМН.
Оценку противовирусного действия монохроматического света проводили по
ингибированию вирусиндуцированного синцитиеобразования, а также накоплению
вирусного антигена в культуральной жидкости, регистрируемого методом
иммуноферментного анализа.
Результаты и обсуждения. Перед инфицированием чувствительных к ВИЧ-1 клеток вирусный
материал облучали в видимой области спектра на линиях магния (516,7; 517,2; 518,2 нм) и линиях
цинка (636,2 нм) отдельно и в комбинации, при полезной мощности света менее 0,1 Вт с
экспозицией 30 и 60 мин.
После получения проб вируса монохроматическим светом материал вносили в лунки с
клеточными культурами. В качестве положительного контроля использовали необлученный
вирус (множественность инфекции 0,1 lg ТЦД/50 клетка), отрицательного незараженные клетки.
Инфицированные культуры инкубировали в течение 4 7 сут в атмосфере с 5% CO2 и 98%
влажности при 37o. Результаты экспериментов представлены в таблице.
Полученные данные показывают, что в случае облучения вируса СПИД комбинированным
светом, соответствующим электронным переходам атомов магния и цинка, снижается
образование вирусиндуцированных синцитиев на 57,7 и 30,8% соответственно. При этом
отмечено заметное снижение уровня накопления вирусного антигена в культуральной
жидкости клеток, зараженных вирусом.
Комбинированное применение монохроматического света, соответствующего электронным
переходам в атомах магния и цинка, вызвало аддитивное уменьшение числа
вирусиндуцированных синцитиев и уровня вирусного антигена. Использование излучения в
видимой области спектра, очевидно, не затрагивает наружной оболочки препарата с
уникальными биологическими свойствами.
Сравнительный эксперимент по облучению вируса СПИД производился следующим образом.
Сначала вирусный материал облучался поочередно светом на длинах волн (516,7; 517,2; 518,2 нм), а
затем этот же вирусный материал с разрывом во времени 15 20 мин облучали светом с длиной
волны 636,2 нм. В результате этого эксперимента оказалось, что инактивация вируса
происходит, но не выше, чем если бы мы светили только одним каким-либо светом.
И только тогда, когда вирусный материал был облучен комбинированным светом
одновременно (без какого-либо разрыва во времени), инактивация его повысилась
существенным образом.
СПИСОК ЛИТЕРАТУРЫ
Федченко П. П. Носик Д. Н. Симонов В. С. Константинов Н. В. Способ инактивации вируса СПИДа.
Патент N 2031945 от 27.03.1995.
ФОРМУЛА ИЗОБРЕТЕНИЯ
Способ инактивации вируса СПИДа, включающий воздействие света с длиной
волны 636,2 нм в течение 30 60 мин, отличающийся тем, что воздействие светом осуществляют
в комбинации со световым потоком с длинами волн 516,7 нм, 517,2 нм, 518,2 нм.
Версия для печати
Дата публикации 06.01.2007гг
вверх
|
