ИЗОБРЕТЕНИЕ
Патент Российской Федерации RU2136002
СПОСОБ ДИАГНОСТИКИ ГНЕЗДНОЙ АЛОПЕЦИИ
Имя изобретателя: Дьяков Валерий Михайлович; Парфенов Герман Иванович
Имя патентообладателя: Дьяков Валерий Михайлович; Парфенов Герман Иванович
Адрес для переписки: 111402, Москва, Аллея Жемчуговой, д1, кв.141, Жилину А.С.
Дата начала действия патента: 1999.01.26
Изобретение относится к области
медицины, в частности к дерматологии, и
может быть использовано при диагностике и
лечении облысения, в частности гнездной
алопеции. Визуально оценивают состояние
кожи и волос, дополнительно проводят
иммунологический анализ крови и по
нарушению клеточного звена иммуной системы
главным образом по количеству натуральных
киллеров- NК (СD 16), превышающем норму,
определяют иммуно-реактивную фазу развития
заболевания. Способ обеспечивает повышение
точности постановки диагноза.
ОПИСАНИЕ ИЗОБРЕТЕНИЯ
Изобретение относится к медицине, в
частности к дерматологии, и может быть
использовано при диагностике и лечении
гнездного облысения (alopecia areata).
Известны различные теории
возникновения алопеции, например,
трофоневротическая, нейроэндокринная,
инфекционная и теория аутоантител [БМЭ, гл.
ред. Б.В.Петровский, т.1, изд. "Советская
энциклопедия", М.,1974 г.].
Этиология и патогенез гнездной алопеции не
известны. Выпадение волос связывают с
такими причинами, как общая интоксикация,
нервный стресс, бактериальное и грибковое
поражения, недостаток витаминов и
микроэлементов и т.д.
Однако ни один из перечисленных факторов не
может самостоятельно вызвать внезапную и
стремительно прогрессирующую алопецию на
фоне недавнего анамнестического
благополучия.
Установлено, что некоторые негативные
факторы, называемые "триггерными" (запускающими),
способны потенцировать появление первых
очагов облысения.
К таким факторам относят острый и
хронический стресс,дисфункцию яичников,
повреждение кожи головы (выдергивание
волос, укол кожи, действие химических
веществ и т.п.), черепно-мозговую травму,
общий наркоз, некоторые пероральные
контрацептивы, аллергические и атопические
реакции, различного рода интоксикации,
гиповитаминоз и т.д.
В клинической практике при выявлении
причин болезни назначаются, как правило,
анализы, характерные не для алопеции, а для
определения сопутствующей патологии: общие
анализы крови и мочи, биохимические анализы,
содержание гормонов в крови,
бактериологические и вирусологические
исследования.
Известно, что постановку диагноза гнездной
алопеции осуществляют в основном путем
визуального осмотра состояния кожи и волос
[В.В.Владимиров, "Диагностика и лечение
кожных болезней", изд. ТОО
Медтехтурсервис,1995 г.;
В.Я.Арутюнов, "Проблема алопеции",
Вестник дерматологии и венерологии, N 12, 1971 г.].
Указанная диагностика не выявляет
первопричин возникновения алопеции и не
определяет эффективных путей ее лечения.
Изобретение направлено на повышение
качества постановки диагноза гнездной
алопеции ("стремительной алопеции").
При этом известный способ диагностики
гнездной алопеции, характеризующийся
проведением визуального осмотра состояния
кожи и волос, дополняют проведением
иммунологического анализа крови и по
нарушению клеточного звена иммунной
системы, главным образом по количеству
натуральных киллеров - NK(CD16), превышающем
норму по абсолютным и относительным
показателям, определяют иммунореактивную
фазу в развитии алопеции.
Проведенные авторами исследования в 1992-1998
гг. в медицинском Центре "Благовест" по
лечению алопеции (г.Москва) показали, что
развитие гнездной алопеции связано прежде
всего с изменением иммунологического
статуса организма. При этом повреждение
клеток волосяного фолликула определяется
не только гуморальными и нервными
факторами, а в первую очередь строго
дифференцированными клетками иммунной
системы.
В патогенезе алопеции лежит генетическая
предрасположенность. Генетическая
аномалия иммунной системы не проявляется
при рождении, она лишь потенцирует
возможность развития заболевания.
Иммунодефицит не является универсальным, а
проявляет строгую специфичность к
определенному антигену. Внедрение антигена
характеризуется отсутствием на данном
этапе воспалительного процесса в
парасосочковой зоне волосяного фолликула,
что говорит о возможном дефекте в
распознавании чужеродного агента
антигенпредставляющими клетками.
Были рассмотрены два этиологических
момента: случайная инвазия вируса с низкой
вирулентностью (авирулентностью) и
врожденный специфический дефицит
противовирусной защиты. Поврежденные "триховирусом"
клетки волосяного фолликула являются
клетками-мишенями, которые после заражения
не прекращают свои жизненно важные циклы и
не препятствуют естественному росту волос.
Клетки Лангерганса (антигенпредставляющие
кожные макрофаги) играют решающую роль в
инициации первичного иммунного ответа. В
норме именно они обязаны принять
информацию от триховируса и
экспрессировать на своей поверхности
трихоантиген, запуская таким образом весь
комплекс иммунных реакций. При алопеции же
этого не происходит и
антигенпредставляющими клетками
становятся сами клетки-мишени волосяного
фолликула, не способные к утилизации вируса.
Триховирус изменяет фрагмент ДНК шестой
хромосомы, отвечающей за экспрессию
антигенов главного комплекса
гистосовместимости. Прежде всего это
касается антигенов 1-ого класса
гистосовместимости HLA-A9, В12, BW18. Эти антигены
представляются аномальными рецепторами на
поверхности матированной клетки. Мутация
клеток является точечной и не препятствует
нормальному росту волоса, не активирует
цитотоксические Т-лимфоциты (CD8) и не
запускает весь комплекс иммунного ответа с
образованием антител в начале заболевания.
Она лишь делает узнаваемыми пораженные
клетки для натуральных киллеров -NK ( CD16).
Исследования показали, что в
иммунореактивной фазе лимфоцитоз
обусловлен повышением числа натуральных
киллеров -NK(CD16), которые осуществляют
контакт с мутированными клетками,
экспрессировавшими тропные рецепторы.
Такая экспозиция приводит киллеры в
состояние возбуждения с проявлением
цитотоксичности. Освобожденные киллером
лимфотоксины нарушают мембранную
проницаемость клеток-мишеней и индуцируют
апоптоз (самостоятельную гибель клетки).
Подтверждением апоптоза является
отсутствие воспаления и некротического
процесса в очагах облысения при Alopecia areata
("Стремительной алопеции").
Известно проведение иммунологических
исследований для диагностики различных
заболеваний. Так например, для определения
субпопуляций и количества иммунных клеток
используют моноклональные антитела, метод
получения которых разработан Ц.Мильштейном
и Г.Келером в 1975 г.
Для иммунофенотипирования (определения)
субпопуляций лимфоцитов используется
иммунофлуоресцентный анализ (ИФА) крови, в
котором моноклональные антитела, меченные
флуорохромом, связываются с мембранными
антигенами живых клеток при их смешивании.
Затем указанная взвесь под давлением
поступает в оптико-электронный прибор-цитофлуориметр
(например, производства фирмы Бектон
Дикинсон Becton Dickinson, США).
Принцип фенотипического анализа клеток
заключается в определении размера клеток и
выявлении связанных с клетками
определенных моноклональных антител, что
отражается в иммунограмме
["Лимфоциты. Методы", Дж. Клаус, Москва.
"Мир",1990 г ].
Основными лимфоцитами, определяемыми с
помощью моноклональных антител, являются: Т-лимфоциты
(CD3), В-лимфоциты (CD19), Т-хелперы (CD4), Т-супрессоры
(CD8), натуральные киллеры - NK (CD16) и т.д.,
количество которых и взаимное соотношение
может меняться в зависимости от исходного
состояния иммунной системы и ее реакции в
результате заболевания.
Количества указанных лимфоцитов, принятые
за норму, приведены в таблице.
 |
Как показывают исследования авторов,
иммунофенотипический анализ крови больных
с гнездной алопецией выявляет отклонения в
иммунограмме от нормы. Нарушение
клеточного звена иммунной системы при
алопеции прежде всего касается натуральных
киллеров- NK(CD16). Превышение их числа от нормы
до 100% и более в абсолютных количествах, а
также увеличение относительного
количества до 70% от верхней границы нормы
указывает на избыточную пролиферацию
натуральных киллеров -NK(CD16) при гнездной
алопеции. Снижение количества Т-лимфоцитов
(CD3) от нижней границы нормы колеблется в
пределах 0-15% в относительных количествах и
0-31% в абсолютных.
Из изложенного можно сделать вывод о том,
что гнездная (очаговая) алопеция - это
аутоиммунная реакция организма,
направленная на мутированные клетки
волосяного фолликула. При этом
аутоиммунный ответ реализуется через
воздействие натуральных киллеров NK(CD16) на
клетки-мишени волосяного фолликула, в
которых запускается механизм
программированной клеточной гибели(апоптоз).
|
Ниже представлены примеры клинических
обследований больных гнездной алопецией,
проведенные в 1998 г. в медицинском Центре "Благовест"
на базе НИИ Иммунологии (г. Москва) с
использованием иммунографического анализа.
Пример 1. Больной М. , 15 лет, выявление
первого очага алопеции за 2 месяца до
обследования. При визуальном осмотре
отмечено продолжение процесса выпадения
волос. В общем анализе крови отмечается
небольшой лимфо- и моноцитоз, биохимические
и гормональные показатели в пределах нормы.
Диагноз: гнездная алопеция, субтотальная
стадия, 30% наличия волос.
При иммунологическом обследовании на
цитофлуориметре (3-цветная проточная
лазерная цитометрия, реагенты и
оборудование фирмы Бектон Дикинсон-Becton
Dickinson, США) выявлено содержание Т-лимфоцитов
CD3+ в абсолютных показателях 1258 кл/мкл и в
относительных 57%. При этом содержание
натуральных киллеров -NK (CD16) составило в
абсолютных и относительных количествах
соответственно 717 кл/мкл и 33%.
Заключение: отмечено превышение над нормой
абсолютного и относительного показателей
для натуральных киллеров и снижение Т-лимфоцитов,
что показывает ярко выраженную
иммунореактивную фазу гнездной алопеции.
Пример 2. Больная Ж.,28 лет, первые очаги
алопеции отмечены в 7-летнем возрасте, через
1 год волосяной покров головы полностью
восстановился. Рецидивирование
заболевания началось за 5 месяцев до
обследования, при этом волосы на голове
потеряны полностью. В общем анализе крови
отмечена незначительная лимфопения.
Респираторными заболеваниями болеет редко,
считает себя здоровой. Диагноз: гнездная
алопеция, тотальная стадия.
При иммунологическом обследовании на
цитофлуориметре (3-цветная проточная
лазерная цитометрия, реагенты и
оборудование фирмы Бектон Дикинсон - Becton
Dickinson, США ) выявлено содержание Т-лимфоцитов
CD3+ в абсолютных показателях 842 кл/мкл и в
относительных 59 %. При этом содержание
натуральных киллеров -NK(CD16) составило в
абсолютных и относительных количествах
соответственно 463 кл/мкл и 33%.
Заключение: отмечено превышение над нормой
абсолютного и относительного показателей
для натуральных киллеров и снижение Т-лимфоцитов,
что также свидетельствует о
иммунореактивной фазе заболевания.
Всего обследовано 78 больных с разными
стадиями гнездной алопеции (очаговой,
субтотальной, тотальной, универсальной),
среди которых было 42 ребенка от 5 до 13 лет, 23
подростка от 13 до 17 лет и 13 взрослых. Все они
находились на разных стадиях потери волос и
в разных фазах иммунологической активности
(иммунореактивная фаза,
иммуноиндиффирентная фаза).
Общей особенностью для большинства больных
оказалось то, что повышение числа
натуральных киллеров- NK(CD16) и снижение
количества Т-лимфоцитов (CD3) сопровождало
стремительный процесс объективного
выпадения волос. Это доказывает участие
натуральных киллеров в патогенезе гнездной
("стремительной") алопеции.
Количество больных с нарушениями
иммунологического статуса в период
активного выпадения волос составило 68,5% по
натуральным киллерам и 39,6% по Т -лимфоцитам
(CD3), что показывает иммунореактивную фазу в
остром периоде заболевания.
Результаты проведенных исследований
подтвердили возможность достоверной
идентификации иммунореактивной фазы
гнездной алопеции, позволяющей
сформировать новое представление об
этиологии и патогенезе заболевания.
ФОРМУЛА ИЗОБРЕТЕНИЯ
Способ диагностики гнездной
алопеции путем проведения визуального
осмотра состояния кожи и волос,
отличающийся тем, что дополнительно
проводят иммунологический анализ крови и
по нарушению клеточного звена иммунной
системы, главным образом по количеству
натуральных киллеров-NK (CD 16), превышающем
норму, определяют иммунореактивную фазу
развития заболевания.
Версия для печати
Дата публикации 01.04.2007гг
вверх
|
