СПОСОБ ДИАГНОСТИКИ СТЕРТОЙ ФОРМЫ ВРОЖДЕННОЙ ГИПЕРПЛАЗИИ КОРЫ НАДПОЧЕЧНИКОВ С ДЕФЕКТОМ 11БЕТА-ГИДРОКСИЛАЗЫ
(51) МПК
G01N 33/74 (2006.01)
(12) ОПИСАНИЕ ИЗОБРЕТЕНИЯ К ПАТЕНТУ РОССИЙСКОЙ ФЕДЕРАЦИИ
Статус: по данным на 28.06.2007 - может прекратить свое действие
--------------------------------------------------------------------------------
Документ: В формате PDF
(14) Дата публикации: 2006.06.27
(21) Регистрационный номер заявки: 2004136346/15
(22) Дата подачи заявки: 2004.12.15
(24) Дата начала отсчета срока действия патента: 2004.12.15
(45) Опубликовано: 2006.06.27
(56) Аналоги изобретения: White P.C. Endocrinol. Metab. Clin. N. Am. 2001, vol.30, №1, p.61-79. RU 2190852 С2, 10.10.2002. SU 1691728 А1, 15.11.1991. RU 2018846 C1, 30.08.1994. SCHNEIDER M.A. et al. Adrenal cortex, tumor and peripheral production of deoxycorticosterone. Steroids. 1992, 57(1), p.7-12, реф.
(72) Имя изобретателя: Великанова Людмила Иосифовна (RU); Ворохобина Наталья Владимировна (RU); Серебрякова Инна Павловна (RU); Бессонова Елена Андреевна (RU)
(73) Имя патентообладателя: Государственное образовательное учреждение дополнительного профессионального образования Санкт-Петербургская медицинская академия последипломного образования Министерства здравоохранения Российской Федерации (RU)
(98) Адрес для переписки: 191015, Санкт-Петербург, ул. Кирочная, 41, МАПО НОИС
(54) СПОСОБ ДИАГНОСТИКИ СТЕРТОЙ ФОРМЫ ВРОЖДЕННОЙ ГИПЕРПЛАЗИИ КОРЫ НАДПОЧЕЧНИКОВ С ДЕФЕКТОМ 11БЕТА-ГИДРОКСИЛАЗЫ
Изобретение относится к медицине, а именно к эндокринологии и лабораторной диагностике и может быть использовано для диагностики стертой формы врожденной гиперплазии коры надпочечников (ВГКН) с дефектом 11 -гидроксилазы при вирильных синдромах, аденомах коры надпочечников и у больных с артериальной гипертензией неясного генеза. Для этого проводят пробу с адренокортикотропным гормоном и методом высокоэффективной жидкостной хроматографии определяют в крови уровни 11-дезоксикортизола (S), кортизола (F), кортизона (Е), кортикостерона (В), рассчитывают соотношения уровня кортизола к уровню кортизона (F/E) и к уровню 11-дезоксикортизола (F/S) и при уровне 11-дезоксикортизола более 7,0 нг/мл, уровне кортикостерона менее 17 нг/мл, соотношении F/E менее 5 и соотношении F/S менее 16 диагностируют стертую форму ВГКН с дефектом 11 -гидроксилазы. Способ обеспечивает дополнительные критерии диагностики.
ОПИСАНИЕ ИЗОБРЕТЕНИЯ
Изобретение относится к медицине, а именно к эндокринологии и лабораторной диагностике, и может быть использовано для диагностики стертой формы врожденной гиперплазии коры надпочечников (ВГКН) с дефектом 11 -гидроксилазы при вирильных синдромах, аденомах коры надпочечников и у больных с артериальной гипертензией неясного генеза.
Важнейшим биохимическим маркером 11 -гидроксилазной недостаточности является 11-дезоксикортизол. Повышение содержания в крови 11-дезоксикортизола (S) и 11-дезоксикортикостерона (DOC) считается характерным лабораторным признаком недостаточности 11 -гидроксилазы. Диагноз может быть заподозрен при повышении концентраций гормонов после стимуляции адренокортикотропным гормоном (АКТГ) в 3 и более раз над 95-м перцентилем нормы для соответствующего возраста (White P.С. Steroid 11 -hydroxylase deficiency and related disorders // Endocrinol. Metab. Clin. N. Am. - 2001. - Vol.30, №1. - P.61-79.). Наиболее распространенными в нашей стране являются пробы с использованием препарата «Синактен-депо», который является синтетическим аналогом АКТГ с длительностью действия 36 часов (пик через 9 часов после введения).
Ряд авторов обращает внимание на то, что у многих пациентов с дефектом 11 -гидроксилазы повышен уровень 17-ОНП, что вполне объяснимо, так как данный стероид является субстратом для синтеза S. Однако это может привести к ошибочной диагностике дефекта 21-гидроксилазы, что повлечет за собой неправильный выбор тактики лечения.
Задачей изобретения является расширение арсенала средств диагностики стертой формы ВГКН с дефектом 11 -гидроксилазы.
Поставленная задача решается тем, что в способе диагностики стертой формы ВГКН с дефектом 11 -гидроксилазы, включающем проведение пробы с адренокортикотропным гормоном и определение в крови уровня 11-дезоксикортизола (S), согласно изобретению методом высокоэффективной жидкостной хроматографии дополнительно определяют в крови уровни кортизола (F), кортизона (Е), кортикостерона (В), рассчитывают соотношения уровня кортизола к уровню кортизона (F/E) и к уровню 11-дезоксикортизола (F/S) и при уровне 11-дезоксикортизола более 7,0 нг/мл, уровне кортикостерона менее 17 нг/мл, соотношении F/E менее 5 и соотношении F/S менее 16 диагностируют стертую форму ВГКН с дефектом 11 -гидроксилазы.
Для определения критериев диагностики были обследованы 26 больных со случайно выявленными опухолями коры надпочечников (инциденталомами), 45 женщин с вирильным синдромом и 19 больных с гипоталамическим синдромом, у которых были установлены нарушения надпочечникового стероидогенеза, характерные для дефекта 11 -гидроксилазы, и 30 здоровых людей, которые составили контрольную группу.
На основании изучения данных, полученных при количественном определении в крови кортикостероидов методом обращенно-фазовой высокоэффективной жидкостной хроматографии (ВЭЖХ) при стимуляции кортикотропином пациентов исследуемых групп, были установлены диагностические критерии стертой формы ВГКН с дефектом 11 -гидроксилазы.
Статистическая обработка данных осуществлялась с использованием пакета STATISTICA for WINDOWS (версия 5.11). Количественные показатели представлялись в виде Me (LQ-UQ), где Ме-медиана, LQ-нижний квартиль, UQ-верхний квартиль. В случае распределения, близкого к нормальному, данные представлялись в виде средних значений (М)±стандартное отклонение (STD). Сравнение средних значений количественных показателей осуществлялось с использованием непараметрического критерия Манна-Уитни. Статистически значимым считался критерий достоверности р<0,05.
Способ осуществляют, например, следующим образом.
Исследования проводят до пробы и на пробе через 9 часов после введения 1 мг «Синактен-депо». Для анализа берут 1 мл сыворотки крови. Хроматографирование проводят, например, при следующих условиях: хроматограф жидкостный Чехия, насос НРР 4001, УФ детектор LCD 2563 ( =254 нм), колонка Kromasil С-18 150 мм, 5 мкм, изократический режим элюирования, подвижная фаза 30% и 45% ацетонитрил-вода CH3CN-H2O (1 часть - 26:74 v/v, 2 часть - 41:59 v/v), скорость элюента 0,3 мл/мин. Для улучшения разделения стероидов, имеющих близкие времена удерживания, применяют -циклодекстрин. Предел обнаружения 1-2 нг/мл.
Определяют уровни 11-дезоксикортизола, кортизола, кортизона, кортикостерона, рассчитывают соотношения уровня кортизола к уровню кортизона (F/E) и к уровню 11-дезоксикортизола (F/S) и при уровне 11-дезоксикортизола более 7,0 нг/мл, уровне кортикостерона менее 17 нг/мл, соотношении F/E менее 5 и соотношении F/S менее 16 на пробе диагностируют стертую форму ВГКН с дефектом 11 -гидроксилазы.
Способ иллюстрируется следующими клиническими примерами.
1. Пациентка Н. 32 г., Вирильный синдром, мышечная слабость, акне, гиперандрогения.
Традиционные методы диагностики:
Проба с синактеном: кортизол - 315-600 нмоль/л, 17-ОНП - 0,9-3,5 нг/мл, андростендион - 1,1-0,9 нг/мл, ДЭА - 15 нг/мл. На основании традиционных методов исключен дефект 21-гидроксилазы.
Данные ВЭЖХ кортикостероидов крови:
№ Наименование Фон Проба с синактеном Ед. измерения
1 Кортизол (F) 73,6 133,6 нг/мл
2 Кортизон (Е) 15,4 32,1 нг/мл
3 Кортикостерон (В) 2,4 11,9 нг/мл
4 11-дезоксикортикостерон (DOC) 1 1 нг/мл
5 11-дезоксикортизол (S) 11,2 15,7 нг/мл
6 F/E 4,7 4,1
7 F/S 6,6 8,5
Увеличение уровня 11-дезоксикортизола на пробе с синактеном до 15,7 нг/мл, повышение кортикостерона до 11,9 нг/мл и индексы F/E и F/S свидетельствуют о стертой форме ВГКН с дефектом 11 -гидроксилазы.
2. Пациент Ш. 18 л. 167 см, 46 кг. Слабость, артериальная гипертензия, задержка полового развития.
№ Наименование Фон Проба с синактеном Ед. измерения.
1 Кортизол (F) 24,2 160,6 нг/мл
2 Кортизон (Е) 14,2 40 нг/мл
3 Кортикостерон (В) 1 15,4 нг/мл
4 11-дезоксикортикостерон (DOC) 3,8 2 нг/мл
5 11-дезоксикортизол (S) 6,3 23,5 нг/мл
6 F/E 1,7 4,0
7 F/S 3,8 6,8
8 17-ОНП 1,0 3,0 нг/мл
9 Кортизол 258 1000 Н моль/л
10 Андростендион 2,4 2,5 нг/мл
11 Тестостерон 12 Н моль/л
12 ДЭА 12 20 Мкг/мл
13 ЛГ 1,7 МЕ/л
14 ФСГ 1,1 МЕ/л
Увеличение уровня 11-дезоксикортизола, уровень кортикостерона и индексы F/S и F/E на пробе с синактеном свидетельствуют о стертой форме ВГКН с дефектом 11 -гидроксилазы.
3. Пациентка Д. 47 лет. - инциденталома 1,3×1,4 см, артериальная гипертензия с 20 лет, ожирение (ИМТ=53,0), синдром поликистозных яичников.
№ Наименование Фон Проба с синактеном Ед. измерения
1 Кортизол (F) 40,7 187,2 нг/мл
2 Кортизон (Е) 10,5 38,2 нг/мл
3 Кортикостерон (В) 2 9,8 нг/мл
4 11-дезоксикортикостерон (DOC) 1 1 нг/мл
5 11-дезоксикортизол (S) 8,4 28,7 нг/мл
6 F/E 3,8 4,9
7 F/S 4,8 6,5
8 17-ОНП 0,5 2,5 нг/мл
9 Кортизол 290 872 Н моль/л
10 Андростендион 3,7 3,3 нг/мл
11 ДЭА-сульфат 2,4 Мкг/мл
Увеличение уровня 11-дезоксикортизола, уровень кортикостерона и индексы F/S и F/E на пробе с синактеном свидетельствуют о стертой форме ВГКН с дефектом 11 -гидроксилазы.
Заявленный способ диагностики стертой формы врожденной гиперплазии коры надпочечников с дефектом 11 -гидроксилазы дает дополнительные критерии диагностики, расширяя тем самым арсенал средств.
ФОРМУЛА ИЗОБРЕТЕНИЯ
Способ диагностики стертой формы врожденной гиперплазии коры надпочечников с дефектом 11 -гидроксилазы, включающий проведение пробы с адренокортикотропным гормоном и определение в крови уровня 11-дезоксикортизола, отличающийся тем, что методом высокоэффективной жидкостной хроматографии дополнительно определяют в крови уровни кортизола, кортизона, кортикостерона, рассчитывают соотношения уровня кортизола к уровню кортизона и к уровню 11-дезоксикортизола и при уровне 11-дезоксикортизола более 7,0 нг/мл, уровне кортикостерона менее 17 нг/мл, соотношении уровня кортизола к уровню кортизона менее 5 и соотношении уровня кортизола к уровню 11-дезоксикортизола менее 16 диагностируют стертую форму врожденной гиперплазии коры надпочечников с дефектом 11 -гидроксилазы.
Независимый научно технический портал
На главную страницу раздела
