ИЗОБРЕТЕНИЕ
Патент Российской Федерации RU2263315

СПОСОБ ДИФФЕРЕНЦИАЛЬНОЙ ДИАГНОСТИКИ ОБОСТРЕНИЯ И РЕМИССИИ ГАСТРОДУОДЕНАЛЬНЫХ ЗАБОЛЕВАНИЙ У ДЕТЕЙ
Имя изобретателя: Комарова Л.Г. (RU); Коркоташвили Л.В. (RU); Бадейнова Е.Н.
Имя патентообладателя: Нижегородский научно-исследовательский институт детской гастроэнтерологии
Адрес для переписки: 603600, г.Нижний Новгород, ул. Семашко, 22, Научно-исследовательский институт детской гастроэнтерологии
Дата начала действия патента: 2002.03.19
Изобретение относится к медицине, в
частности к гастроэнтерологии, и может быть
использовано для диагностики. Способ
заключается в том, что исследуют слюну
больного ребенка и определяют в ней
содержание мочевой кислоты и при его
значении 118,8 мкмоль/л и выше диагностируют
обострение заболевания, а 117,5 мкмоль/л и
ниже - ремиссию. Способ обеспечивает
простоту, атравматичность и доступность
диагностики в педиатрической практике.
ОПИСАНИЕ ИЗОБРЕТЕНИЯ
Изобретение относится к области
медицины, а именно к гастроэнтерологии, и
может быть использовано в широкой
медицинской практике для диагностики фазы
обострения или ремиссии
гастродуоденальных заболеваний у детей.
Наиболее информативным считается
способ эндоскопического исследования с
прицельной биопсией, который дает
возможность оценить функцию и структуру
органов гастродуоденальной зоны (А.И.Волков
и др. Современные инструментальные методы в
комплексном обследовании
гастродуоденальной слизистой у детей.
Методические рекомендации. Горький. 1981 г.).
Однако этот способ диагностики
достаточно сложен с точки зрения
необходимости наличия специального
дорогостоящего оборудования, специалиста-эндоскописта
и морфолога. Кроме того, данный способ
сопряжен с опасностью возникновения
осложнений и травматичен.
Известны способы лабораторной
диагностики фазы гастродуоденального
заболевания: по повышению концентрации
гистамина в базальной порции желудочного
сока (Способ диагностики обострения
язвенной болезни двенадцатиперстной кишки.
Авт. свид. №1264410 от 23.10.86. Комарова Л.Г. и др.).
Однако этот способ требует процедуры
зондирования, что является травматичным
для ребенка. И, кроме того, методика
исследования гистамина в любой
биологической жидкости трудоемка.
За прототип предлагаемого изобретения
выбран лабораторный способ
дифференциальной диагностики обострения и
ремиссии гастродуоденальных заболеваний,
включающий биохимическое исследование
слюны (Л.Г.Комарова, И.А.Переслегина, Л.В.Коркоташвили
«Способ дифференциальной диагностики
обострения и ремиссии гастродуоденальных
заболеваний». Свидетельство №1262380,
зарегистрировано в Государственном
реестре 16.10.85 г.).
Данный способ заключается в том, что о
наличии обострения или ремиссии
гастродуоденального заболевания судят по
соотношению содержания в слюне
аденозинтрифосфорной и пировиноградной
кислот, взятых в процентах от нормы, и при
этом показателе ниже 0,5 диагностируют
обострение, а выше 0,5 - ремиссию заболевания.
Способ атравматичен, позволяет с высокой
степенью точности осуществлять
диагностику.
Однако использование известного способа
требует проведения двух методик, что
сопряжено с большим расходом реактивов,
наличием специального оборудования и
большой затратой времени (5-6 часов).
Целью предлагаемого изобретения является
упрощение способа за счет определения
одного показателя в той же биологической
среде - слюне.
Поставленная цель достигается тем, что в
предлагаемом способе, включающем
биохимическое исследование слюны,
определяют содержание мочевой кислоты в
слюне и при ее значении 118 мкмоль/л и выше
диагностируют обострение
гастродуоденальных заболеваний, а ниже -
ремиссию.
Новым в способе является исследование
мочевой кислоты в слюне, так как раньше ее
определяли в других биологических средах и
по другому назначению.
Так, известно участие мочевой кислоты в
генезе артериальной гипертонии, патологии
почек и др. Пурины в организме являются
полифункциональными соединениями,
обладающими способностью регулировать
соотношение между активностью
симпатической и парасимпатической нервной
системы, а нарушение равновесия этих систем
может приводить к ряду заболеваний, в том
числе желудочно-кишечного тракта (Ю.И.Ровда,
И.В.Павлов, В.И.Хиченко и др. Педиатрия 1995 г.,
№3, с.82-84).
Определение мочевой кислоты в слюне
необходимо и достаточно для постановки
диагноза обострения или ремиссии
гастродуоденальных заболеваний у детей.
Работоспособность способа доказана
следующими фактами:
Проведено обследование 58 детей с
гастродуоденальными заболеваниями. Из них
31 - с обострением и 27 - ремиссией
патологического процесса. В слюне
определяли содержание мочевой кислоты,
величина которой менялась в фазу
обострения в диапазоне 118,8-635,3 мкмоль/л, а в
фазу ремиссии 15,8-117,5 мкмоль/л.
Таблица 1
Концентрация мочевой кислоты в слюне (мкмоль/л) |
| Группы обследуемых
детей |
Концентрация мочевой
кислоты |
| Гастродуоденальные
заболевания |
Обострение
Пределы колебаний |
232,5+18,8 (n=31) р<0,001
118,8-635,3 |
Ремиссия
Пределы колебаний |
60,2+5,65 (n=27)
15,8-117,5 |
Таблица 2
Диапазон колебаний содержания мочевой
кислоты в слюне при гастродуоденальном
заболевании у детей |
| № |
Фаза обострения |
№ |
Фаза ремиссии |
| |
Фамилия |
Мочевая кислота, мкмоль/л |
|
Фамилия |
Мочевая кислота, мкмоль/л |
| 1 |
Больной Б. |
145,6 |
1 |
Больной А. |
21,2 |
| 2 |
В. |
225,0 |
2 |
Б. |
32,9 |
| 3 |
В. |
566,1 |
3 |
В. |
47,7 |
| 4 |
Е. |
176,5 |
4 |
В. |
117,5 |
| 5 |
3. |
271,4 |
5 |
Г. |
108,0 |
| 6 |
И. |
206,0 |
6 |
Д. |
39,0 |
| 7 |
И. |
165,0 |
7 |
Е. |
40,0 |
| 8 |
К. |
180,3 |
8 |
К. |
31,6 |
| 9 |
К. |
142,1 |
9 |
К. |
53,7 |
| 10 |
К. |
405,0 |
10 |
К. |
80,1 |
| 11 |
К. |
190,8 |
11 |
Л. |
78,1 |
| 12 |
Л. |
316,4 |
12 |
Л. |
75,0 |
| 13 |
Л. |
118,8 |
13 |
М. |
80,0 |
| 14 |
Л. |
273,3 |
14 |
М. |
15,8 |
| 15 |
Л. |
220,0 |
15 |
М. |
65,9 |
| 16 |
Л. |
184,4 |
16 |
М. |
47,4 |
| 17 |
М. |
210,0 |
17 |
Н. |
37,5 |
| 18 |
М. |
281,3 |
18 |
Н. |
49,0 |
| 19 |
М. |
255,8 |
19 |
Н. |
40,8 |
| 20 |
Н. |
305,0 |
20 |
О. |
31,3 |
| 21 |
Н. |
247,0 |
21 |
Р. |
28,0 |
| 22 |
О. |
139,2 |
22 |
Р. |
88,0 |
| 23 |
П. |
164,0 |
23 |
С. |
63,2 |
| 24 |
Р. |
188,0 |
24 |
С. |
50,0 |
| 25 |
С. |
252,6 |
25 |
С. |
24,0 |
| 26 |
С. |
635,3 |
26 |
Ф. |
40,0 |
| 27 |
С. |
158,3 |
27 |
Ш. |
112,0 |
| 28 |
С. |
169,0 |
|
|
|
| 29 |
С. |
375,0 |
|
|
|
| 30 |
С. |
187,5 |
|
|
|
| 31 |
С. |
252,6 |
|
|
|
Диагноз верифицирован данными
гастрофиброскопии и РН-метрии желудочного
сока.
Установлено, что все дети с содержанием в
слюне мочевой кислоты выше 118,8 имели
обострение заболевания, тогда как у детей с
уровнем определяемого вещества ниже этого
значения диагностировалась ремиссия.
Способ осуществляют следующим образом:
утром натощак собирают слюну путем
сплевывания в центрифужную пробирку. Затем
слюну центрифугируют 10 минут при 3000 об/мин.
Принцип метода
Мочевая кислота восстанавливает
фосфорнофольфрамовый реактив с
образованием голубого цвета, оптическая
плотность которого при 640 нм
пропорциональна концентрации мочевой
кислоты в сыворотке крови.
Состав набора
1. Натрий вольфрамовокислый, двухводный, 5
г - 1 флакон;
2. Натрий карбонат, 20,6 г - 1 упаковка;
3. Фосфорновольфрамовый реактив, 100 мл - 1
флакон;
4. Основной калибровочный растров мочевой
кислоты, 6 ммоль/л, 3 мл - 1 флакон.
Вспомогательные реактивы.
Кислота серная, концентрированная (96%), хч -
1 мл.
В состав набора не входит.
Оборудование
Спектрофотометр или
фотоэлектроколориметр, центрифуга.
Образец
Слюна, разведенная дистиллированной
водой в 10 раз.
Приготовление рабочих растворов
1. Раствор серной кислоты, 0,35 моль/л. В
мерную колбу вместимостью 50 мл наливают 20
мл дистиллированной воды, 1,0 мл
концентрированной серной кислоты и доводят
объем водой до метки. Раствор стабилен.
2. Раствор натрия вольфрамовокислого.
Содержимое флакона с натрием
вольфрамовокислым количественно переносят
в мерную колбу вместимостью 50 мл и доливают
дистиллированной водой до метки. Раствор
стабилен.
3. Раствор натрия карбоната. Содержимое
упаковки с натрием карбонатом
количественно переносят в мерную колбу
вместимостью 200 мл, растворяют в
дистиллированной воде, и доводят объем
водой до метки. Раствор стабилен.
4. Рабочий калибровочный раствор мочевой
кислоты. Отмеряют точно 1,0 мл основного
калибровочного раствора мочевой кислоты,
переносят в мерную колбу вместимостью 200 мл
и доводят объем дистиллированной водой до
метки. Раствор стабилен в течение 2 недель
при хранении при температуре 4-8°С.
Полученный раствор содержит 30 мкмоль/л
мочевой кислоты.
Ход определения
В центрифужную пробирку вносят:
| |
Холостая проба, мл |
Калибровочная проба, мл |
Опытная проба, мл |
| Вода дистиллированная |
- |
- |
4,0 |
| Биологическая жидкость |
- |
- |
0,50 |
| Перемешивают |
| Раствор серной кислоты 0,35 моль/л |
- |
- |
0,25 |
| Раствор натрия
вольфрамовокислого |
- |
- |
0,25 |
| Тщательно перемешивают,
переворачивая пробирку и через 5 минут
центрифугируют 10 минут при 3000 об/мин. |
| Надосадочная жидкость |
- |
- |
2,00 |
| Рабочий калибровочный раствор
мочевой кислоты |
- |
2,00 |
- |
| Вода дистиллированная |
2,00 |
- |
- |
| Растров натрия карбоната |
1,00 |
1,00 |
1,00 |
| Фосфорнофольфрамовый реактив |
0,50 |
0,50 |
0,50 |
| Тщательно перемешивают,
переворачивая пробирку и через 5 минут
центрифугируют 10 минут при 3000 об/мин. |
Через 30 минут определяют экстинцию при 640
(580-700) нм при красном светофильтре ФЭКа.
Расчет содержания проводят по формуле
С(мкмоль/л)=Еоп/Ест×Сст×10, где
Еоп - экстинция опытной пробы против
холостой пробы;
Ест - экстинция калибровочной пробы
против холостой пробы;
Сст - концентрация рабочего
калибровочного раствора, 30 мкмоль/л;
10 - пересчет на разбавленную слюну.
Определяют содержание мочевой кислоты в
слюне у больного и при содержании ее 118,8 и
выше диагностируют обострение
гастродуоденальных заболеваний, а при
значении показателя ниже этой цифры -
ремиссию.
Клинические примеры исполнения способа
Пример 1
Больная Лебедева Оля, 10 лет. История
болезни №1136/1995 г. Находилась на
стационарном лечении в НИИ детской
гастроэнтерологии с диагнозом: язвенная
болезнь 12-перстной кишки в фазе обострения,
хронический гастродуоденит в фазе
обострения. При поступлении проведено
обследование мочевой кислоты в слюне. В
результате содержание мочевой кислоты
составило 118,8 мкмоль/л. При повторных
исследованиях уровень мочевой кислоты
варьировал до 211,6; 316,4; 331,6 мкмоль/л. Все это
свидетельствовало об обострении
патологического процесса. Последующее
гастрофиброскопическое обследование
подтвердило диагноз, выявив выраженные
признаки обострения. В процессе лечения
была достигнута ремиссия. Концентрация
мочевой кислоты снизилась до 110,0 мкмоль/л,
сопровождаемая улучшением общепринятых
лабораторных показателей, включая
гастрофиброскопию.
Пример 2
Воропаев Сергей, 12 лет. История болезни
№674/1995 г. Поступил в Нижегородский НИИ
детской гастроэнтерологии с диагнозом:
язвенная болезнь 12-перстной кишки,
хронический гастродуоденит в фазе ремиссии.
При поступлении проведено определение
мочевой кислоты в слюне. Величина
показателя соответствовала 117,5 мкмоль/л,
что указывало на фазу ремиссии. Данные
гастрофиброскопии (слизистая желудка
бледно розового цвета, гиперплазирована,
привратник сомкнут, луковица 12-перстной
кишки не деформирована, рисунок слизистой
сохранен) подтвердили диагноз.
Использование предлагаемого способа
дифференциальной диагностики обострения и
ремиссии гастродуоденальных заболеваний в
сравнении с известными позволяет получить
положительный эффект, который выражается в
упрощении и сокращении времени проведения,
атравматичности и доступности объекта
исследования. Способ дополнительно может
использоваться для динамического
наблюдения за эффективностью лечения.
Предлагаемый способ особенно ценен в
педиатрической практике, так как абсолютно
безвреден, прост и доступен в применении в
любых условиях.
ФОРМУЛА ИЗОБРЕТЕНИЯ
Способ дифференциальной
диагностики обострения и ремиссии
гастродуоденальных заболеваний у детей,
включающий биохимическое исследование
слюны, отличающийся тем, что в слюне
определяют содержание мочевой кислоты и
при его значении 118,8 мкмоль/л и выше
диагностируют обострение, а при 117,5
мкмоль/л и ниже - ремиссию
гастродуоденальных заболеваний.
Версия для печати
Дата публикации 29.03.2007гг

вверх
|