СПОСОБ ПРОГНОЗИРОВАНИЯ ИНФЕКЦИОННЫХ ЗАБОЛЕВАНИЙ У ДОНОШЕННЫХ НОВОРОЖДЕННЫХ
(51) 7 G01N33/577
(12) ОПИСАНИЕ ИЗОБРЕТЕНИЯ К ПАТЕНТУ РОССИЙСКОЙ ФЕДЕРАЦИИ
Статус: по данным на 10.08.2007 - прекратил действие, но может быть восстановлен
--------------------------------------------------------------------------------
Документ: В формате PDF
(14) Дата публикации: 2005.11.27
(21) Регистрационный номер заявки: 2004103045/15
(22) Дата подачи заявки: 2004.02.04
(24) Дата начала отсчета срока действия патента: 2004.02.04
(43) Дата публикации заявки: 2005.07.10
(45) Опубликовано: 2005.11.27
(56) Аналоги изобретения: SU 1778706 A1, 30.11.1992. SU 1291880 A1, 23.02.1987. WO 97/42341 A1, 13.11.1997.
(72) Имя изобретателя: Посисеева Л.В. (RU); Сотникова Н.Ю. (RU); Пелевина М.И. (RU); Кудряшова А.В. (RU); Беликова М.Э. (RU)
(73) Имя патентообладателя: Государственное учреждение "Ивановский научно-исследовательский институт материнства и детства им. В.Н. Городкова" Минздрава России (RU)
(98) Адрес для переписки: 153731, г.Иваново, ул. Победы, 20, Ивановский НИИ материнства и детства им. В.Н. Городкова, патентный отдел
(54) СПОСОБ ПРОГНОЗИРОВАНИЯ ИНФЕКЦИОННЫХ ЗАБОЛЕВАНИЙ У ДОНОШЕННЫХ НОВОРОЖДЕННЫХ
Изобретение относится к лабораторной диагностике и может быть использовано для прогнозирования инфекционных заболеваний у доношенных новорожденных. Сущность способа состоит в том, что в I триместре беременности (6-13 недель) в периферической венозной крови женщин с угрозой невынашивания определяют относительное содержание CD16 +CD56- лимфоцитов и при его значении, равном или менее 11%, прогнозируют развитие инфекционных заболеваний у доношенных новорожденных в первые 7-10 дней жизни. Техническим результатом является прогнозирование с высокой точностью развития локальных форм инфекционно-воспалительных заболеваний у доношенных новорожденных в первые 7-10 дней жизни. 1 табл.
ОПИСАНИЕ ИЗОБРЕТЕНИЯ
Изобретение относится к медицине, а именно к акушерству и перинатологии, и может быть использовано для прогнозирования инфекционных заболеваний у доношенных новорожденных путем исследования периферической венозной крови женщин в ранние сроки беременности.
Актуальность предлагаемого способа. Частота инфекционной патологии в структуре заболеваемости доношенных новорожденных остается высокой и составляет, по данным различных авторов, 6-53% [5, 6, 7].
Удельный вес локальных форм гнойно-воспалительных заболеваний новорожденных составляет 70-80% [5, 6]. Отмечаемый повсеместно рост числа неонатальных инфекций диктует необходимость поиска новых возможностей их прогнозирования с целью профилактики серьезных осложнений.
Известен способ прогнозирования бактериальных осложнений у новорожденных путем регистрации индуцированной люминолом клеточной хемилюминисценции в цельной крови в присутствии кристаллов труднорастворимых солей. При повышении свето-суммы в 2 и более раз от исходной прогнозируют развитие бактериальных осложнений [10].
Недостатки способа:
1. Исследование выполняется у новорожденных, тем самым исключая возможность профилактики различных инфекционно-воспалительных осложнений в антенатальном периоде.
2. Способ затруднен большой трудоемкостью при проведении анализа, так как требует постановки одновременно и спонтанной, и индуцированной хемилюминесценции.
3. Метод клеточной хемилюминесценции недостаточно специфичен, так как содержание средних молекул, определяющих уровень хемилюминесценции, неспецифически повышается при любом хроническом воспалительном процессе.
4. Не указывается возраст, в который рекомендуется проводить обследование.
5. Отсутствуют данные о точности способа.
Наиболее близким по техническому решению является способ прогнозирования инфекционно-воспалительной патологии у недоношенных новорожденных путем определения содержания IgE в периферической крови новорожденных на 3 сутки жизни: при уровне IgE выше 3,5 МЕ/мл прогнозируют возникновение инфекционно-воспалительной патологии [11].
Недостатки способа:
1. Неонатальные инфекции прогнозируются только у недоношенных новорожденных, у которых всегда присутствуют иммунологические нарушения [12].
2. Повышение уровня IgE отмечается при ряде иммунодефицитных состояний генетического генеза (синдроме Вискотта-Олдрича, миеломной болезни, дисгаммаглобулинемии), что снижает специфичность и точность способа.
3. IgE может связываться с поверхностью реагирующих клеток, и при этом уровень его в крови не повышается, поэтому возможен большой процент ложноотрицательных результатов.
4. Не указывается точность способа.
Указанные недостатки могут быть устранены в предлагаемом способе.
Заявляемый технический результат достигается тем, что в I триместре беременности (6-13 недель) в периферической венозной крови беременных женщин с угрозой невынашивания определяют относительное содержание CD16 +CD56- лимфоцитов и при значении этого показателя, равном или менее 11%, прогнозируют развитие локальных форм инфекционно-воспалительных заболеваний у доношенных новорожденных в первые 7-10 дней жизни с точностью 77,42%, чувствительностью 100% и специфичностью 72,00%.
Новизна заявляемого способа заключается в том, что впервые предлагается прогнозировать развитие локальных форм инфекционно-воспалительных заболеваний у доношенных новорожденных в первые 7-10 дней жизни по определению относительного содержания CD16+CD56- лимфоцитов в периферической венозной крови беременных женщин с угрозой невынашивания в I триместре беременности.
Известно, что циркулирующие в периферической крови естесственные киллеры (NK-клетки) с фенотипом CD16 + в значительной своей части не несут на своей поверхности CD56 молекулу и являются CD16+СD56- клетками [13]. Благодаря экспрессии на своей поверхности Fc рецептора III типа (CD16) к Fc-фрагменту иммуноглобулина G NK клетки распознают инфицированные вирусами клетки, на поверхность которых сели антитела класса G против вирусных антигенов, и развивают в отношении этих клеток-мишеней антителозависимую клеточную цитотоксичность. Ранее исследования CD16+CD56- субпопуляции NK у беременных женщин в первом триместре беременности не проводились.
Способ осуществляется по стандартной методике следующим образом (1):
1) Выделение лимфоцитов из периферической венозной крови;
2) 100 мкл лимфоцитов в концентрации 1×10 6 кл/мл инкубируют с 20 мкл моноклональных анти-CD16, меченных FITC и с 20 мкл моноклональных анти-СD56, меченных РЕ, в течение 30 минут при комнатной температуре в темноте, после чего клетки отмывают 1 раз 1 мл физиологического раствора центрифугированием при 1500 об/мин в течение 2 минут. Клетки ресуспендируют в 500 мкл физиологического раствора. Учет реакции проводят на проточном цитометре, определяя содержание CD16+CD56- клеток в лимфоцитарном гейте. Результат читается в процентах (%).
Существенными отличиями заявленного способа являются:
- предложен новый прогностический параметр относительного содержания CD16+CD56- лимфоцитов в периферической венозной крови у женщин с угрозой невынашивания в I триместре беременности равный или менее 11%, - для прогнозирования развития локальных форм инфекционно-воспалительных заболеваний у доношенных новорожденных в первые 7-10 дней жизни.
Сущность заявляемого способа поясняется следующими примерами.
Пример 1. Беременная Л., 25 лет. Настоящая беременность вторая. Первая беременность закончилась самопроизвольным выкидышем в сроке 8 недель. В сроке 6-7 недель поступила в стационар с жалобами на тянущие боли внизу живота, мажущие кровянистые выделения из половых путей. По данным УЗИ - беременность 7 недель, гипертонус матки, эхопризнаки отслойки плодного яйца.
Диагноз: Беременность 7 недель. Отягощенный акушерско-гинекологический анамнез. Угрожающий выкидыш.
При обследовании заявляемым способом: относительное содержание CD16+CD56- лимфоцитов - 5%, что ниже прогностического уровня на развитие локальных форм инфекционно-воспалительных заболеваний у доношенных новорожденных в первые 7-10 дней жизни.
Заключение по заявляемому способу: прогнозируется развитие локальных форм инфекционно-воспалительных заболеваний у доношенных новорожденных в первые 7-10 дней жизни.
При дальнейшем обследовании на урогенитальную инфекцию - обнаружены антигены хламидий в цервикальном канале и антитела класса Ig М к хламидиям в периферической крови. После проведенной сохраняющей терапии женщина выписана из стационара с прогрессирующей беременностью в сроке 10 недель. Беременность закончилась своевременными родами и рождением доношенного новорожденного массой 3300 г, ростом 54 см, с оценкой по шкале Апгар 8/9 баллов. При обследовании у ребенка выявлен ринит хламидийной этиологии. Ребенок получил антибактериальную терапию, выписан на 7 сутки.
Прогноз развития инфекционных заболеваний у новорожденного по заявляемому способу подтвердился.
Пример 2. Беременная С., 26 лет. Настоящая беременность вторая. Первая беременность закончилась своевременными родами и рождением доношенного новорожденного весом 3000 г, ростом 51 см, с оценкой по шкале Апгар 8/9 баллов. В сроке 12 недель поступила в стационар с жалобами на тянущие боли внизу живота, по данным УЗИ - беременность 12 недель, гипертонус матки.
Выставлен диагноз: Беременность 12 недель. Угрожающий выкидыш.
При обследовании заявляемым способом: относительное содержание CD16+CD56- лимфоцитов - 14%, что выше прогностического уровня на развитие локальных форм инфекционно-воспалительных заболеваний у доношенных новорожденных в первые 7-10 дней жизни.
Заключение по заявляемому способу: развитие локальных форм инфекционно-воспалительных заболеваний у доношенных новорожденных в первые 7-10 дней жизни не прогнозируется.
После проведенной сохраняющей терапии женщина выписана из стационара с прогрессирующей беременностью в сроке 14-15 недель. Беременность закончилась своевременными родами и рождением доношенного новорожденного массой 3400 г, ростом 51 см, с оценкой по шкале Апгар 8/9 баллов. Ребенок выписан на 5 сутки с диагнозом: здоров.
Прогноз по заявляемому способу подтвердился.
Пример 3. Беременная М., 23 лет. Настоящая беременность первая. В анамнезе - бесплодие 3 года. Поступила в стационар с жалобами на тянущие боли внизу живота, по данным УЗИ - беременность 10 недель, повышение тонуса матки. 17-КС мочи - 16,2 мг/сут. Осмотрена эндокринологом.
Заключение: гиперандрогения. Гирсутный синдром. Результаты обследования на урогенитальную инфекцию - отрицательные. Выставлен диагноз: Беременность 10 недель. Угрожающий выкидыш. Отягощенный гинекологический анамнез (бесплодие 3 года). Гиперандрогения. Гирсутный синдром.
При обследовании заявляемым способом: относительное содержание CD16+CD56- лимфоцитов - 11%, что равно прогностическому уровню на развитие локальных форм инфекционно-воспалительных заболеваний у доношенных новорожденных в первые 7-10 дней жизни.
Заключение по заявляемому способу: прогнозируется развитие локальных форм инфекционно-воспалительных заболеваний у доношенных новорожденных в первые 7-10 дней жизни.
После проведенной сохраняющей и гормональной терапии женщина выписана из стационара с прогрессирующей беременностью в сроке 13 недель. Беременность закончилась своевременными родами и рождением доношенного новорожденного массой 3000 г, ростом 50 см, с оценкой по шкале Апгар 8/9 баллов. При обследовании у ребенка выявлена инфекция мочевыводящих путей. Ребенок получил антибактериальную терапию. Выписан домой в удовлетворительном состоянии на 7 сутки.
Прогноз по заявляемому способу подтвердился.
Указанным способом обследована 31 женщина в 6-13 недель гестации. Результаты исследований сведены в таблицу 1
Таблица
Показатель Количество обследованных
Всего женщин 31
истинно-положительный результат 6
ложноположительный результат 7
истинно-отрицательный результат 18
ложноотрицательный результат 0
Итого:
точность заявляемого способа - 77,42%
чувствительность заявляемого способа - 100%
специфичность заявляемого способа - 72,00%
Преимущества заявляемого способа:
1. Исследование периферической венозной крови у женщины проводится в раннем сроке беременности (6-13 нед.), что позволяет еще во время беременности прогнозировать развитие локальных форм инфекционно-воспалительных заболеваний у доношенных новорожденных в первые 7-10 дней жизни и своевременно провести комплекс профилактических мероприятий, начиная с антенатального периода.
2. Возможно прогнозирование локальной неонатальной инфекционно-воспалительной патологии до появления клинических признаков заболевания.
3. Метод может быть использован в качестве скрининга на развитие локальных форм инфекционно-воспалительных заболеваний у доношенных новорожденных в первые 7-10 дней жизни.
4. Заявляемый способ прост в исполнении, не требует больших временных затрат и осуществляется в течение 1 часа 40 минут.
5. Высокая точность 77,42%, чувствительность 100% и специфичность 72,00% способа.
Таким образом, заявленный способ прост в исполнении и позволяет с высокой точностью прогнозировать развитие локальных форм инфекционно-воспалительных заболеваний у доношенных новорожденных в первые 7-10 дней жизни у женщин с угрозой невынашивания беременности при обследовании в I триместре беременности, что позволит выбрать правильную тактику ведения женщин с риском развития локальных форм инфекционно-воспалительных заболеваний у доношенных новорожденных в первые 7-10 дней жизни, своевременно провести комплекс лечебно-профилактических мероприятий и будет способствовать снижению частоты данной патологии плода и новорожденного, и уменьшению экономических затрат на лечение.
СПИСОК ЛИТЕРАТУРЫ:
1. Boyum A. Isolation of mononuclear cell and granulocytes from human blood and bone marrow // ScandJ.Clin.Lab.Invest. - 1968. - v.21. - № 97. - р.77.1.
2. Кетлинский С.А., Калинина Н.М. Иммунология для врачей. - С-Пб., 1998. - 110 с.
3. Клиническая иммунология: Учебник для студентов медицинских вузов / Под ред. А.В.Караулова. - М.: Медицинское информационное агентство, 1999. - 604 с.
4. Ярилин А.А. Основы иммунологии: Учебник. - М.: Медицина., -1999, - 608 с.
5. Шабалов Н.П. Неонатология. T.1. - СПб.: Специальная литература, 1995. - 494 с.
6. Яцык Г.В. Руководство по неонатологии. - М., 1998. - 400 с.
7. Сидорова И.С., Черниенко И.Н. Внутриутробные инфекции: хламидиоз, микоплазмоз, герпес, цитомегалия // Рос. Вестник перинатологии и педиатрии. - 1998. - Т.43, № 3. - С.7-13.
8. Симакова М.Г., Смирнова B.C., Дурова А.А Клиника, диагностика и лечение внутриутробной инфекции // Акушерство и гинекология. - 1995. - № 4. - С. 7-9.
9. Ецко Л.А. Современные медицинские технологии в ранней диагностике и лечении внутриутробной инфекции и плацентарной недостаточности // Охрана здоровья матери и ребенка: Сборник тезисов. Роль инфекции в патологии репродуктивной системы женщины, плода и новорожденного. - Москва: МОРАГ ЭКСПО, 2000. - С.119-121.
10. Патент № 2102753, Россия. Способ прогнозирования бактериальных осложнений новорожденных / О.В.Муравьев, В.В.Эстрин, Н.Н.Крайнова, Е.Н.Шамраева (Россия) // Бюллетень изобретений. - 1998. - № 2. - ч.2. - с.362.
11. А.С. № 1778706, Россия. Способ прогнозирования инфекционно-воспалительной патологии у недоношенных новорожденных / А.М.Петрова, Г.А.Емельянов, Н.А.Жерносек (Россия) // О.Б. "Изобретения". - 1992. - № 44. - C.148.
12. Торубарова Н.А., Кошель И.В., Яцык Г.В. Кроветворение плода и новорожденного - М.: Медицина, 1993. - С.95-117.
13. Хаитов Р.М., Игнатьева Г.А., Сидорович И.Г. Иммунология: Учебник. - М.: Медицина, 2000. - 432 с.
ФОРМУЛА ИЗОБРЕТЕНИЯ
Способ прогнозирования инфекционных заболеваний у доношенных новорожденных путем исследования периферической крови, отличающийся тем, что в I триместре беременности (6-13 недель) в периферической венозной крови женщин с угрозой невынашивания определяют относительное содержание CD16+CD56- лимфоцитов и при его значении, равном или менее 11%, прогнозируют развитие инфекционных заболеваний у доношенных новорожденных в первые 7-10 дней жизни.
Независимый научно технический портал
На главную страницу раздела
