СПОСОБ ЛЕЧЕНИЯ НЕВЫНАШИВАНИЯ БЕРЕМЕННОСТИ
(51) МПК
A61K 35/14 (2006.01)
A61P 15/06 (2006.01)
A61B 8/00 (2006.01)
(12) ОПИСАНИЕ ИЗОБРЕТЕНИЯ К ПАТЕНТУ РОССИЙСКОЙ ФЕДЕРАЦИИ
Статус: по данным на 07.09.2007 - действует
--------------------------------------------------------------------------------
Документ: В формате PDF
(14) Дата публикации: 2006.09.20
(21) Регистрационный номер заявки: 2004111829/14
(22) Дата подачи заявки: 2004.04.20
(24) Дата начала отсчета срока действия патента: 2004.04.20
(43) Дата публикации заявки: 2005.09.27
(45) Опубликовано: 2006.09.20
(56) Аналоги изобретения: KWAK JY et al. Immunoglobulin G infusion treatment for women with recurrent spontaneous abortions and elevated CD 56+ natural killer cells. Early Pregnancy. 2000 Apr; 4(2): 154-64. RU 2184968 C1, 10.07.2002. US 925346 A1, 07.05.1982. ЗАРЕЦКАЯ Ю.М. Клиническая иммуногенетика. М.: Медицина, 1986, 207 с. Клиническое руководство по ультразвуковой диагностике. Под ред. В.В.МИТЬКОВА и др. М.: Видар, т.2, стр.9-23. BEER A.E. et al. Peripheral blood lymphocyte in women with recurrent pregnancy loss. Clin. Immunol. - 1996. - N 15. - P.37-39.
(72) Имя изобретателя: Сидельникова Вера Михайловна (RU); Сухих Геннадий Тихонович (RU); Кирющенков Петр Александрович (RU); Верясов Валерий Николаевич (RU)
(73) Имя патентообладателя: Сидельникова Вера Михайловна (RU); Сухих Геннадий Тихонович (RU); Кирющенков Петр Александрович (RU); Верясов Валерий Николаевич (RU)
(98) Адрес для переписки: 142279, Московская обл. Серпуховский район, п.Оболенск, а/я 36, В.Н.Верясову
(54) СПОСОБ ЛЕЧЕНИЯ НЕВЫНАШИВАНИЯ БЕРЕМЕННОСТИ
Изобретение относится к медицине, к акушерству, и может быть использовано для лечения невынашивания беременности. Перед планируемой беременностью у женщины определяют уровень CD 56+ лимфоцитов в периферической крови и при их содержании выше нормы проводят курсы лимфоцитоиммунотерапии (ЛИТ) донорскими лимфоцитами, причем ЛИТ проводят на 5-6 день фертильного цикла до восстановления нормальных показателей уровня CD 56+ лимфоцитов, а с момента установления беременности ЛИТ проводят по результатам УЗИ, причем при наличии гипоплазии хориона - каждые 2 недели, а при соответствии толщины хориона гестационному возрасту - каждые 3-4 недели до 12-14 недель беременности. Данное изобретение способствует адекватному развитию хориона и плаценты за счет нормализации содержания CD 56+ лимфоцитов. 2 табл.
ОПИСАНИЕ ИЗОБРЕТЕНИЯ
Изобретение относится к медицине, а именно к акушерству, и касается способа лечения женщин с осложненным репродуктивным анамнезом.
Среди множества причин, лежащих в основе раннего прерывания кариотипически нормальной беременности, выделяют форму, связанную с повышенным содержанием лимфоцитов в периферической крови с фенотипом CD56+, а также в эндометрии и децидуальной ткани (1, 2, 3). Кроме цитолитических функций в децидуальной ткани данный тип натуральных киллерных клеток (CD56+ ) способен синтезировать ряд провоспалительных цитокинов (в первую очередь фактор некроза опухоли альфа). В результате повышенной активности СD56-позитивных клеток нарушаются процессы имплантации, происходит повреждение клеток плаценты, развивается децидуальный некроз(4).
Известен способ лечения (5) данной патологии с использованием лимфоцитоиммунотерапии (ЛИТ). При этом рекомендуется использовать клетки мужа (отца будущего ребенка), проводить ЛИТ с момента установления беременности и каждые 5-7 недель до 10-12 недель беременности без учета особенностей развития хориона и плаценты по данным УЗИ. Beer A.E. с соавторами (6) считают, что для нормального лечения беременности уровень CD56+ лимфоцитов не должен превышать 12%, а при уровне данных клеток 18% и более рождение жизнеспособного потомства невозможно.
Недостатком данного способа является то, что используются лимфоциты мужа без учета возможности совместимости супругов по антигенам гистосовместимости. С момента установления беременности ЛИТ проводят без контроля за динамикой развития хориона и плаценты по результатам УЗИ.
Задача изобретения заключается в нормализации содержания CD 56+ лимфоцитов, что способствует адекватному развитию хориона и плаценты.
Поставленная задача решается предлагаемым способом. Способ заключается в исследовании проб периферической крови, в которой определяют уровень CD56+ лимфоцитов и при их содержании выше нормы проводят от 1 до 4 процедур ЛИТ донорскими лимфоцитами, затем повторяют ЛИТ с момента установления беременности, дополнительно проводят ЛИТ на 5-6 день предполагаемого фертильного цикла, до восстановления нормальных показателей уровня CD56+ лимфоцитов (до 4-8%), причем с момента установления беременности ЛИТ проводят по результатам УЗИ при наличии гипоплазии хориона каждые 2 недели и при соответствии хориона гестационному возрасту - каждые 4 недели до 12-14 недель беременности.
Донорами лейкоцитов периферической крови являются здоровые как мужчины, так и женщины в возрасте от 20 до 40 лет, прошедшие проверку на отсутствие СПИДа, сифилиса, гепатита, не имеющие на день сдачи крови изменений в биохимическом составе крови.
Забор крови в объеме 50 мл производят из локтевой вены в 50-миллилитровые пластиковые стерильные флаконы, содержащие гепарин (5 ЕД на 1 мл крови). Флаконы выдерживают 2 часа в вертикальном положении при 37°С. Надосадочную лейкоцитарную массу (10-15 мл) переносят в центрифужные 15-миллилитровые пробирки и центрифугируют при 150 g в течение 10 минут. Надосадочную жидкость удаляют, а осадок клеток ресуспендируют в течение 20-30 секунд в 3 мл дистиллированной воды. К суспензии клеток добавляют 10-12 мл физиологического раствора и клетки осаждают центрифугированием. Процедуру лизиса эритроцитов проводят 3-4 раза до их исчезновения. Очищенную суспензию лейкоцитов растворяют в 2 мл физиологического раствора. Введение клеток проводят внутрикожно в 10-12 точек наружной части предплечья.
Отличительными признаками предлагаемого способа следует считать использование донорских лейкоцитов для ЛИТ, проведение ЛИТ на 5-6 день предполагаемого фертильного цикла, до восстановления нормальных показателей (4-8%) уровня CD+ лимфоцитов, во время беременности периодичность процедур ЛИТ определяется показателями УЗИ.
Данные признаки позволяют добиваться адекватного развития хориона и плаценты при нормализации содержания СD56-позитивных клеток.
Для раскрытия сущности изобретения ниже приведены примеры и результаты клинико-лабораторных исследований предлагаемого способа.
Изучение субпопуляционного состава лимфоцитов периферической крови до и после проведения курсов ЛИТ.
Таблица 1
Относительное содержание основных клеточных популяций в периферической крови женщин с осложненным репродуктивным анамнезом (%).
Кластер дифференцировки (CD) До проведения ЛИТ (n=30) После проведения ЛИТ (n=30) Контрольная группа (n=20)
3 62,2+2,8 69,3+3,2 70,3+3,5
4 37,5+3,0 38,1+3,3 42,4+1,0
8 24,4+2,7 24,6+3,1 28,2+2,8
4/8 1,6+0,1 1,6+0,1 1,7+0,1
19 5,9+0,3 5,7+0,2 5,5+0,3
16 10,0+1,7 10,2+2,0 10,6+1,7
56 16,2+2,6 5,2+1,3* 3,9+0,7
р<0,05 после проведения ЛИТ
Вывод: после проведения ЛИТ происходит нормализация относительного содержания клеток периферической крови с фенотипом CD56+, что способствует адекватному развитию хориона и плаценты.
1. Исследование влияния ЛИТ на состояния хориона.
Таблица 2
Динамика изменения толщины хориона и плаценты (методом УЗИ) на фоне проведения ЛИТ
Толщина хориона (см) Гестационный возраст (нед.)
6-7 8-9 10-11 12-14
1. Беременные с гипоплазией хориона (n=30) 0,31+0,02 P2-1<0,05 0,49+0,03 P2-1<0,05 0,81+0,04 P2-1>0,05 1,1+0,05 P2-1>0,05
2. Здоровые беременные (n=20) 0,50+0,04 0,75+0,05 0,93+0,05 1,2+0,06
Вывод: несмотря на нормализацию субпопуляционного состава лимфоцитов до наступления беременности, в последующем возможно развитие гипоплазии хориона.
Проведение ЛИТ в данной ситуации имеет высокую эффективность, что выражается в выравнивании толщины хориона начиная с 10-11 недель.
Сущность изобретения поясняется следующими примерами.
Пример 1.
Больная Д., 24 года, В анамнезе 1 искусственный аборт, 1 неразвивающаяся беременность в 12-13 недель. Из гинекологических заболеваний отмечался аденомиоз, внутриматочная перегородка (проведена резектоскопия). При обследовании вне беременности уровень CD56+ в периферической крови составил 12%. Проведено 2 курса ЛИТ с интервалом в 3 недели. Перед наступлением беременности содержание CD56+ составило 5,7%. На 5 день цикла проведена ЛИТ. Во время беременности в динамике проводилась УЗИ:
1. В сроке 5 недель, толщина хориона 0,2 см, хорион кольцевидный, проведена ЛИТ.
2. В сроке 8 недель 2 дня, толщина хориона 0,6 см, хорион кольцевидный, проведена ЛИТ.
3. В сроке 14 недель, толщина плаценты 1,4 см, плацента по передней стенке.
4. В сроке 18-19 недель, толщина плаценты 1,7 см, плацента по передней стенке. Далее беременность протекала без осложнений. Роды через естественные родовые пути в сроке 39 недель, родилась девочка массой 3300 г, рост 50 см, с оценкой по шкале Апгар 8/9 баллов. Течение послеродового и раннего неонатального периодов без осложнений.
Пример 2
Больная К., 34 года. В анамнезе 2 неразвивающиеся беременности в 5 недель. Патоморфологическое исследование абортного материала - атрофия ворсин хориона, дистрофические и некротические изменения в децидуальной ткани. Гинекологические заболевания отсутствуют. При обследовании вне беременности содержание CD56+ в периферической крови 9,3%. Проведено 2 курса ЛИТ с интервалом в 3 недели. Перед наступлением беременности уровень CD56+ составлял 6,1%. На 6 день цикла проведена ЛИТ. Во время беременности в динамике производилась УЗИ:
1. В сроке 4 недели проведена ЛИТ.
2. В сроке 7,5 недель - хорион кольцевидный, толщина хориона 0,4 см, проведена ЛИТ.
3. В сроке 8 недель 4 дня - хорион кольцевидный, ширина 0,8 см, расположен по передней стенке, имеется участок отслоения 1,6×0,3×1,3 см без наружного кровотечения, проведена ЛИТ.
4. В сроке 12 недель - плацента толщиной 1,6 см по передней стенке, доходит до области внутреннего зева.
5. В сроке 17 недель - плацента толщиной 1,8 см по передней стенке, доходит до области внутреннего зева.
Далее беременность протекала без осложнений. Родоразрешена путем операции кесарева сечения в 38 недель. Родился мальчик массой 3700 г., рост 52 см, с оценкой по шкале Апгар 8/9 баллов. Течение послеоперационного и раннего неонатального периодов без особенностей.
Пример 3
Больная А., 33 года. В анамнезе 2 искусственных аборта, 3 неразвивающиеся беременности в 9, 6, 6 недель. Гинекологические заболевания: хронический аднексит, аденомиоз. Вне беременности содержание CD56+ в периферической крови 14%. Проведено 2 курса ЛИТ с интервалом 3 недели, уровень CD56+ составил 7,2%. На 5 день цикла проведена ЛИТ. Во время беременности УЗИ в динамике:
1. В срок 5-6 недель, хорион кольцевидный, толщина 0,2 см, проведена ЛИТ.
2. В срок 8 недель 3 дня, хорион в дне матки с переходом на заднюю стенку, толщина 1 см, имеется участок отслойки хориона 1,2×0,5 см, без наружного кровотечения, проведена ЛИТ.
3. В сроке 15 недель, плацента по средней стенке 0-1 степени зрелости, толщина плаценты 2,3 см.
Беременность осложнилась развитием плацентарной недостаточности. Родоразрешена путем операции кесарева сечения в 39 недель. Родился мальчик массой 3500 г, рост 49 см, с оценкой по шкале Апгар 8/8 баллов. Течение послеоперационного и раннего неонатального периодов без осложнений.
Пример 4
Больная Г., 24 года. В анамнезе: 1 неразвивающаяся беременность в 6 недель. Гинекологические заболевания - гиперандрогения, эрозия шейки матки. Вне беременности содержание CD56+ составило 9,5%. Проведено 2 курса ЛИТ с интервалом в 3 недели. Уровень CD56+ снизился до 6,1%, на 6 день цикла проведена ЛИТ. УЗИ в динамике беременности:
1. В сроке 5 недель 2 дня хорион кольцевидный, толщина 0,3 см, проведена ЛИТ.
2. В сроке 7 недель 6 дней, хорион по задней стенке матки, толщиной 0,7 см, проведена ЛИТ.
3. В сроке 12 недель, плацента по задней стенке матки, толщиной 1,3 см.
Далее беременность протекала без осложнений. Роды через естественные родовые пути. Родилась девочка весом 3700 г, рост 56 см, с оценкой по шкале Апгар 7/8 баллов. Течение послеродового и раннего неонатального периода без осложнений. Результаты проведенных исследований, в сравнении с литературными данными (прототип), позволяют сделать вывод, что предлагаемый способ обладает следующими преимуществами:
1. Использование донорских клеток для ЛИТ сводит к минимуму вероятность совместимости по антигенам HLA.
2. Использование ЛИТ на 5-6 день предполагаемого фертильного цикла создает оптимальный иммунологический фон предстоящей беременности.
3. ЛИТ высокоэффективна при наличии гипоплазии хориона в 1 триместре беременности. Периодичность проведения ЛИТ определяется показателями состояния хориона (по данным УЗИ).
Таким образом, предлагаемый способ значительно повышает эффективность лечения невынашивания беременности и позволяет в комплексе с традиционными методами добиться рождения жизнеспособного потомства в 95% случаев.
Источники информации
1. Clifford R., Flanagan A.M., Regan L. Endometrial CD56+ natural killer cell in women with recurrent miscarriage: a histomorphometric study // Hum.Reprod. - 1999. - Vol.14. - №11. - P.2727-2730.
2. Yamamoto Т., Takahashi Y., Kase N., Mori H. Decidual natural killer cell in recurrent spontaneous abortion with normal chromosomal content // Am.J.Reprod. Immunol. - 1999. - Vol.41. - №5. - P.337-242.
3. Coulam C.B,, Godman C., Roussev R.G., Sistemic CD56+ cells can predict pregnancy outcom // Am.J.Reprod.Immunol. - 1995. - №33. - P.219-222.
4. Hill J.A., Choi B.C. Maternal immunological aspects of pregnancy success and failure // J of Repr. And Fert.Suppl. - 2000. - №55. - P.91-97.
5. Beer A.E., Kwak J.Y.H. Reproductive Medicine Program. Finch University of Health Science. - Chicago Medical School, 2000.
6. Beer A.E., Kwak J.Y.H. Peripheral blood lymphocyte in women with recurrent pregnancy loss // Clin.Immunol. - 1996. - №15. - p.37-39.
ФОРМУЛА ИЗОБРЕТЕНИЯ
Способ лечения невынашивания беременности путем исследования пробы периферической крови, в которой определяют уровень CD 56+ клеток и при их содержании выше нормы проводят курсы лимфоцитоиммунотерапии (ЛИТ) донорскими лимфоцитами, затем с момента установления беременности ЛИТ повторяют, отличающийся тем, что дополнительно проводят ЛИТ на 5-6 день фертильного цикла до восстановления нормальных показателей уровня CD 56+ лимфоцитов, а с момента установления беременности ЛИТ проводят по результатам УЗИ, причем при наличии гипоплазии хориона - каждые 2 недели, а при соответствии толщины хориона гестационному возрасту - каждые 3-4 недели до 12-14 недель беременности.
Независимый научно технический портал
На главную страницу раздела
